美國藥典USP40〈1223〉對NAT法支原體檢測產品有關性能驗證的要求，包括專屬性、檢測限（LOD）、耐用性、重現性。其中對于定量限（LOD）的定義及驗證方法如下：一種備用微生物方法的檢測限(LOD)定義為在規定的實驗條件下，在規定體積的樣品中可以檢測但不一定定量的微生物的蕞低數量。這應與在抗 菌效果試驗、非無菌產品的微生物檢驗：微生物枚舉試驗、非無菌產品的微生物檢驗:特定微生物檢驗、支原體檢驗和無菌性檢驗中引用的質量控制生物進行，視替代方法而定。細胞的支原體檢測——qPCR法。廣州細胞支原體檢測公司
中國藥典ChP2020〈9201〉對NAT法支原體檢測產品有關性能驗證的要求，包括檢測限（LOD）、專屬性、耐用性、重現性。其中對于檢測限（LOD）的定義及驗證方法如下：在替代方法設定的檢驗條件下，樣品中能被檢出的微生物的蕞低數量。由于微生物所具有的特殊性質，檢測限是指在稀釋或培養之前初始樣品所含有的微生物數量，而不是指檢驗過程中某一環節的供試液中所含有的微生物數量。中國藥典要求檢測口腔支原體、肺炎支原體、豬鼻支原體；細胞支原體檢測產品日本藥典對支原體檢測的要求。
常用的支原體檢測方法有傳統的分離培養法、指示細胞培養法（DNA染色法）、ELISA法、PCR法等。分離培養法基本不會出現假陰性結果，因此被譽為支原體檢測金標準。不過也存在四個弊端，一是檢測時間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間；二是盡管可以檢測絕大多數支原體種類，分離培養法也有力所不及的時候，例如豬鼻支原體(M.hyorhinis)；三是易出現假陽性，因為在培養時需以陽性菌株為對照，易出現交叉污染；四是對實驗室條件要求比較高。
支原體可以與宿主細胞競爭營養素和代謝物前體，因此它們能改變許多細胞功能，影響到細胞代謝和細胞生長，蕞終導致細胞死亡。通過對受污染的人源細胞進行微陣列分析，科學家發現支原體嚴重影響數百個基因的表達，當中包括受體、離子通道、生長因子和致ai基因。一旦與宿主細胞膜粘附或融合，支原體可以通過干擾信號級聯和細胞因子產生，進一步損害細胞。這些有害效應會強烈干擾實驗數據，導致研究結果無效，特別是當涉及表達TLR2的免疫細胞時，如巨噬細胞。qPCR法支原體檢測的優點有哪些？
常用的支原體檢測方法有傳統的分離培養法、指示細胞培養法（DNA染色法）、ELISA法、PCR法等。指示細胞培養法（DNA染色法）則靈敏度比較低，因背景熒光的存在，細胞輕度支原體污染不易檢出；細胞裂解死亡產生碎片也會被熒光染料染色被誤認為是支原體染色所致造成假陽性；另外，熒光染色法一般要求培養無污染的指示細胞作為對照，增加了檢測的工作量。目前，PCR法為主流的支原體檢測手段，PCR法比傳統分離培養法檢測時間大縮短，且靈敏度高。qPCR法支原體檢測試劑盒有哪些？肺炎支原體檢測產品
支原體檢測和清理辦法。廣州細胞支原體檢測公司
南京正揚生物自主研發生產的支原體檢測試劑盒(熒光探針法)是基于NAT(nucleicacidamplificationtechniques)的一種快速定性檢測生產原料、細胞庫、病毒種子、病毒或細胞收獲液、治 療用細胞中潛在支原體污染的產品。該試劑盒采用多重PCR的方法，使用2種熒光探針，FAM和VIC，分別檢測目標序列和內參。可覆蓋100多種支原體DNA序列；并且嚴格按照EP2.6.7進行專屬性、檢測限、耐用性驗證，檢測限滿足≤10CFU/mL的要求，具備靈敏度高、特異性好、安全性好等特點。廣州細胞支原體檢測公司