慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,從而達到良好的的基因zhi liao效果。對于一些較難轉染的細胞,如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,使用慢病毒載體,能da da提高目的基因的轉導效率,且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率da da增加,能夠比較方便快捷地實現目的基因的長期、穩定表達。LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!新合成的逆轉錄病毒DNA整合到宿主DNA中稱為原病毒。自動化慢病毒轉導方案
研究發現 LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產生比polybrene更高的轉導效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉導效率的潛力。細胞狀態對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響,良好的生長狀態是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態較好、輪廓清晰、處于對數生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST相關技術文章,歡迎咨詢上海曼博生物!也可關注我們的公眾號:Mine-bio自動化慢病毒轉導方案什么可以增加慢病毒轉導的速度?
SirionBiotechGmbH公司于2007年在德國馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應的模式。Sirion載體被用于基因功能研究、臨床前靶點驗證、基因zhi liao和疫苗開發。SirionTechnologies獲得了歐洲和美國幾項主要臨床試驗(PhaseI/II/III)的許可,是歐洲主要的病毒載體技術商業供應商,在短時間內可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個性化項目管理服務。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高慢病毒轉導效率。為提供更好的服務,上海曼博生物醫藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區域LentiBOOST產品業務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。
人間充質干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉導可誘導長期轉基因表達,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優化轉導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉導增強劑,可以按照現行的GMP標準生產,且很容易應用于現有的轉導方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉導研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉錄病毒的轉導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉導。更多技術文章歡迎關注公眾號:Mine-bio慢病毒轉染可以使用哪些試劑呢?
第三代慢病毒載體系統又增加了兩個安全特性:一是構建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強子及啟動子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動子序列,這樣原始的HIV基因組中的9個基因在慢病毒載體中只保留了3個(gag、pol和rev) ,因此第三代慢病毒載體系統更加安全。與第三代系統相比,第二代慢病毒系統使用更多的HIV蛋白(在較少的質粒上)以產生功能性慢病毒顆粒。第三代包裝系統不表示tat,被認為比第二代系統更安全,但可能更難使用,因為它們需要用四個單獨的質粒轉染才能產生功能性慢病毒顆粒。慢病毒包裝系統一般都是三質粒或四質粒包裝系統。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!什么試劑可以增強慢病毒轉導的效率?關于慢病毒轉導常見問題
可以增加慢病毒轉染的速度的試劑是什么?自動化慢病毒轉導方案
di yi代慢病毒載體以Naldini以及Kafri[2]構建的三質粒系統為dai biao。該載體系統由包裝質粒、包膜質粒及載體質粒3種質粒組成。將包膜蛋白單獨置于一個質粒中進行表達,包裝載體含有除包膜蛋白編碼基因的全病毒基因組,使用CMV啟動子進行表達,并用人胰島素基因的polyA替代3’LTR作為加尾信號,同時將外源插入片段以及所有相關順式作用元件置于外源表達載體中。第二代慢病毒載體系統是在di yi代基礎上改進的,在包裝質粒中刪去了HIV的所有附屬基因vif、vpu、vpr和nef,以減少產生RCR的風險。這些附屬基因的去除并不影響病毒的滴度和轉染能力,同時增加了載體的安全性。自動化慢病毒轉導方案