產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長連續性乙烯亞胺片段,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,適用于基礎學術研究和藥物研發早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法)。歡迎關注曼博生物公眾號:Mine-bio用PEI轉染時,一般和DNA的比例會是多少?MirusPEI轉染試劑優化要素
材料:質粒DNA指數生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃備用。1×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃備用。方法:1.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上(根據實驗需要選擇培養皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90%)。根據細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。更多產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!天津高質量PEI轉染試劑官方代理無需復雜操作,PEI試劑簡化基因導入流程。
PEIMAX粉末配置方法:1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中;2)放入攪拌轉子,放置于磁力攪拌器上,設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦;3)等待PEIMAX40K完全溶解,通常需要5分鐘左右;4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1;5)如果不小心超過7.1,則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1;6)將溶液轉移到1L玻璃量筒中,加入水定容至1L;7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液;8)按需分裝,4°C儲存(切記不可冷凍);注:未經配制的粉末有效期為2年。配置成液體后分裝在合適的瓶子中,并且保存在4℃的轉染試劑將可在6個月之內保持性能。如jin用于蛋白定性研究,分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。
產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長連續性乙烯亞胺片段,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,適用于基礎學術研究和藥物研發早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法)。PEI轉染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。
1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優化。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物。也可關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章!PEI轉染試劑主要成分是什么?MirusPEI轉染試劑優化要素
PEI轉染試劑和其他轉染試劑相比有什么優勢?MirusPEI轉染試劑優化要素
對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。Polysciences轉染與遞送相關產品已正式移交Kyfora Bio,相關產品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences,后續購買請認準備新品牌。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物!MirusPEI轉染試劑優化要素