293細胞PEI轉染試劑使用說明

穩定轉染方法:1.接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。更多關于PEI轉染試劑相關的產品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉染試劑主要成分是什么？293細胞PEI轉染試劑使用說明

穩定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。PolysciencesPEI轉染試劑哪個品牌好PEI轉染試劑有哪些品牌？

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到宜轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優化。

瞬時轉染方法1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉染試劑相關問題，歡迎咨詢上海曼博生物！哪款PEI轉染試劑的轉染效率高呢？

Polysciences是一家化學品制造公司，產品廣泛應用于各個科研領域。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學家揭示未知領域。隨后，開拓了在病理（組織研究）應用產品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開發染料和染色劑，以實現更好的樣品觀測方式。與government合作，開發了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家cancer中心合作，開發天然產物分離和純化產品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發出超順磁珠，用于DNA、蛋白質和肽的研究。Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用，并不斷開發和增強其性能。近期業務擴展到電子產品，Polysciences的精密微粒子產品拓展了納米技術應用中測量精度。公司秉承為應用而研發，目前已擁有超過3000種產品。PolysciencesInc.致力于提供先進的技術、制造能力和技術支持，幫助客戶實現他們的目標。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉染試劑相關問題，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉染時一般和DNA的比例是多少？科研級PEI轉染試劑用途

PEI轉染試劑的殘留檢測方法怎么開發呢？293細胞PEI轉染試劑使用說明

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