大鼠脂肪間充質干細胞分離自脂肪組織;脂肪間充質干細胞 ( adipose-derived stemcells,ADSCs)源自于胚胎發育時期的中胚層,是一類具有自我更新和多分化潛能的成體干細胞。其可以在特定的條件下誘導分化為脂肪、骨、軟骨、胰島 β 細胞和心肌等多種細胞,另外其免疫原性較低,因此,廣泛應用于臨床;與骨髓間充質干細胞相比,在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是,脂肪干細胞更易獲得足夠的細胞數量切對患者損傷較小,是更為理想的字體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪干細胞,脂肪干細胞形態以梭形為主。BrdU可標記其核。菩禾生產的人視網膜微血管內皮細胞采用胰蛋白酶和膠原酶混合消化制備而來。表皮角化細胞細胞技術指導
目前面部或口腔重大神經損傷的標準策略是采用神經自體移植(Nerveautograft),即從患者手臂或腿部取下神經并移植。盡管顯微外科技術不斷進步,神經自體移植仍然存在一定局限,不對未受損部位造成損傷,并且在修復較大的神經損傷時,完整性和功能性神經再生效果不佳。研究表明,干細胞聯合神經引導導管(NGCs)具有替代神經移植的潛力。近日,研究人員展示了一種牙齦來源間充質干細胞(GMSC)結合生物支架修復外周神經的策略。研究人員將GMSC引入膠原蛋白水凝膠中并誘導其轉變為施旺細胞樣細胞(Schwann-likecell),即神經系統中產生髓鞘和神經生長因子的促再生性細胞。將這些細胞遷移到神經導管中,形成功能化的神經導管,軸突受到引導在損傷留下的間隙中產生。隨后研究人員構建了面部神經損傷的嚙齒動物模型以驗證GMSC細胞結合神經導管移植的功效。結果顯示,與移植空的神經導管的空白組相比,接受GMSC結合神經導管移植的動物模型的面部下垂程度較低,神經導管也得到了恢復。在移植后,植入的GMSC也在嚙齒動物體內存活了幾個月。此外,GMSC結合神經導管移植后的修復效果與神經自體移植效果相同。肝星形細胞細胞特價大鼠肺微血管內皮細胞分離自肺;
三、實驗用品1、試劑:三尖杉酯堿(HT),300μg/ml,100mmol/LTris-HCl(),5mol/LEDTA緩沖液、堿性裂解液:,1%SDS、醋酸鈉:3mol/LKAc();異丙醇;70%乙醇;溴酚藍,蔗糖指示劑。TBE電泳緩沖液,1%瓊脂糖,溴乙錠。PI母液:500μg/ml;Ho33342母液:2mmol/L。2、儀器設備:熒光顯微鏡,電泳儀,電泳槽,微量加樣器(1ml,100μl)、,載玻片,蓋玻片。四、實驗材料人早幼粒白血病HL-60細胞,用含10%小牛血清的RPMI1640培養基在37°C,5%CO2條件下培養。五、方法步驟1、三尖杉酯堿誘發HL-60細胞凋亡(1)實驗前約24小時,接種兩瓶HL-60細胞,標記(6)、(37),每瓶含約5ml培養液,置2°C,<>%CO<>培養箱培養。(2)實驗前約,當細胞密度達到70%,(200)號瓶加入三尖杉酯堿1μl,使終濃度為7μg/ml,(4)號瓶中加入同等量PBS()作對照。共同放入培養箱中繼續培養<>.<>小時。2、Ho33342和PI雙重染色鑒別三種細胞(1)染色:將瓶中的細胞搖勻取200μl于,加入Ho33342母液2μl,PI20μl,染色15分鐘。(2)滴片:取一載玻片用雙面膠圍成一小室,從離心管中各取以上染色后的細胞懸液10μl,加入小室內蓋上蓋玻片,熒光鏡下用紫外激發光。
目前缺血性腦卒中患者為有效的藥物是組織纖溶酶原劑(tPA)。但tPA溶栓會引起血腦屏障(BBB)破壞,導致出血轉化,不僅減弱了藥物發揮的效果,并且與不良預后和死亡密切相關。因此找到有效的臨床干預措施對于改善tPA效益仍然十分迫切。研究表明,間充質干細胞來源胞外囊泡(MSC-EVs)能夠自由通過BBB,具有良好的BBB保護作用以及促進組織損傷修復功能。采用MSC-EVs聯合tPA溶栓缺血性腦卒中具有理論依據。近日,研究人員報道MSC-EVs通過抑制星形膠質細胞活化和炎癥,從而發揮BBB保護作用,進而改善tPA缺血性腦卒中的效益。研究人員構建大腦中動脈閉塞后再通(MCAO/R)的缺血性腦卒中小鼠模型,并在使用tPA前加用MSC-EVs處理。結果發現,與tPA單獨處理相比,經MSC-EVs處理后BBB破壞程度減輕,出血轉化減少,小鼠神經功能改善。熒光成像發現MSC-EVs可透過BBB并集聚在顱內缺血區,增加了星形膠質細胞的攝取。進一步機制研究發現,MSC-EVs通過miR-125b-5p靶向TLR4/NF-κB通路,進而抑制星形膠質細胞活化和炎癥,從而發揮BBB保護作用。大鼠大隱靜脈平滑肌細胞分離自大隱靜脈。
大鼠牙周膜干細胞分離自牙齒組織;牙周組織是由牙周膜、牙槽骨和牙齦三部分組成,它的主要功能是支持、固定和營養牙齒。牙周膜它是一種致密的纖維組織,一端埋入牙骨質,一端連接牙槽骨,實際上是牙齒通過牙周膜被懸吊在牙槽窩中,使牙齒能牢固地固定在頜骨的牙槽窩內,具有一定的彈性,有利于緩沖牙齒承受的咀嚼力。牙髓的神經、血管通過根尖孔與牙槽骨和牙周膜的血管、神經相連接。營養物質通過血液供給牙髓,營養牙齒,所以牙齒和牙周組織關系密切。間充質干細胞(mesenchymalstemcells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。目前,牙周支持組織重建主要依賴機械、藥物或引導組織再生技術,隨著分子生物學、組織工程學和干細胞技術的飛速發展,牙周組織再生工程技術成為牙周病***研究的熱點,牙周膜干細胞(Periodontalligamentstemcell,PDLSC)是牙周組織再生工程的關鍵種子細胞之一。菩禾生產的人頸動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶和膠原酶混合消化制備而來。骨髓間充質干細胞細胞廠家
大鼠軟骨細胞分離自關節軟骨。表皮角化細胞細胞技術指導
皮膚創傷是一個普遍存在的健康問題,隨著各類衰老、代謝性疾病的日益多發,遷延不愈的創面發生也呈現逐年增高趨勢,嚴重影響患者生活質量,給家庭和社會帶來沉重經濟負擔。脂肪干細胞來源外泌體(ADSC-Exos)被認為是修復皮膚傷口的有前途的策略,其不僅具有與來源干細胞類似的生物學功能,還具有低免疫原性、易于存儲和高效的生物活性特點。研究表明,ADSC-Exos的組成成分和效果高度依賴于其來源細胞的狀態,通過藥物處理、缺氧培養等均可影響ADSC-Exos的生物活性或提高特定疾病的效果。因此通過工程化策略,提高ADSCs-Exos促進創面愈合效果具有實踐意義。近日,研究人員報道了E2F1缺失的ADSCs-Exos(ADSCE2F1-/--Exos)促進創面愈合的潛在機制。研究人員構建了小鼠皮膚全層缺損模型,探討了ADSCE2F1-/--Exos皮膚損傷的作用和機制。結果顯示,ADSCE2F1-/--Exos可促進血管生成,成纖維細胞膠原形成,進而加速創面愈合,并且效果優于對照組ADSC-Exos。miRNA測序發現E2F1-ADSC相比對照ADSC,高表達膠原形成相關miR-130b-5p。進一步機制研究,E2F1通過與miR-130b-5p前體結合后調控miR-130b-5p表達。隨后,ADSCE2F1-/--Exos可將miR-130b-5p傳遞至成纖維細胞中。表皮角化細胞細胞技術指導