ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在用酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的時候,為了保證實驗結(jié)果的線性,MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。str服務(wù)
您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達,少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測和量化靶基因的表達。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達分析,這些引物組能特異性地識別和高效地擴增靶基因的cDNA。
可以應(yīng)用以下等領(lǐng)域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細胞之間的信號異常,
3、確定藥物作用機制,
4、預(yù)測各種疾病的藥物療效,
5、評估藥物對基因表達和信號傳導(dǎo)的影響。
分選試劑盒為雜交瘤細胞生長期間和之后定性和定量抗體類別同種型提供了一種快速靈敏且簡便的方法,用于評估免疫應(yīng)答。
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)zhi的診斷試劑離不開優(yōu)zhi的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。與MTT相比較,cck-8法優(yōu)勢明顯。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),cck-8檢測OD值與活細胞數(shù)的線性關(guān)系比MTT法明顯。而且,MTT法產(chǎn)生不溶于水的藍紫色結(jié)晶,需要有機溶劑DMSO溶解,操作過程中常會出現(xiàn)溶解不完全或細胞丟失的現(xiàn)象,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。cck-8法只是加染料的一步操作,操作簡單,檢測可實時,免去了去除培養(yǎng)基的操作。對環(huán)境保護更為有利,不使用有機溶劑DMSO,所需的耗材也少。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組,使宿主細胞長時間穩(wěn)定表達外源基因。
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢1.靈敏度高:靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析能夠檢出放射性免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無法檢出的物質(zhì),對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。2.寬的線性動力學(xué)范圍:發(fā)光強度在4-6個量級之間,與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色酶聯(lián)免疫分析吸光度(OD值)2.0的范圍相比,優(yōu)勢明顯。雖然同位素放射免疫也有較寬的線性動力學(xué)范圍,但是放射性限制其應(yīng)用。3.光信號持續(xù)時間長:化學(xué)發(fā)光免疫分析的光信號持續(xù)時間可達數(shù)小時甚至一tian,簡化了實驗操作及測量。4.分析方法簡便快速:絕大多數(shù)分析測定jin需加入一種試劑(或符合制劑)的一步模式。5.結(jié)果穩(wěn)定、誤差小:樣本本身發(fā)光,不需要額外光源,避免了外來因素的干擾(光源穩(wěn)定性、光散射、光波選擇器),分析結(jié)果穩(wěn)定可靠。6.安全性好及使用期長:到目前為止還未發(fā)現(xiàn)化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的危害性;另外這些試劑穩(wěn)定,保存期可達一年之久。WST-1在代謝活性細胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶友好的細胞活力和增殖的比色測量。人前顆粒體蛋白ELISA試劑盒
良好光穩(wěn)定性:克服了FITC易淬滅的缺點,細胞分群更明顯。str服務(wù)
與正常細胞相比,ai細胞的代謝機制會發(fā)生變化,以滿足增殖的需求,使其成為判斷ai變的一個重要因素。ai細胞內(nèi)代謝的改變增加了其大分子的生物合成,創(chuàng)出了新的微環(huán)境以應(yīng)對活性氧 (ROS) 的增加。這種代謝改變背后的驅(qū)動因素包括基因表達的改變以及代謝酶活性的改變。
代謝檢測是一個復(fù)雜的過程,為了簡化繁瑣的操作,快速獲得數(shù)據(jù),各種檢測試劑盒應(yīng)運而生。Abcam也提供各類代謝檢測試劑盒,科研用戶只需通過酶標(biāo)儀、顯微鏡或流式細胞儀,就可直接讀取活細胞、裂解液和生物流體樣本的數(shù)據(jù)即可。 str服務(wù)
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。