平滑肌細胞轉染試劑盒

來源: 發(fā)布時間:2021-10-29

慢病毒載體(Lentiviralvector)較逆轉錄病毒載體有更廣的宿主范圍,慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細胞。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性細胞、干細胞、受精卵以及分化的后代細胞中表達shRNA,實現(xiàn)在多種類型的細胞和轉基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達的功能性沉默,為在原代的人和動物細胞組織中快速而高效地研究基因功能,以及產(chǎn)生特定基因表達降低的動物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者,不但具備特異性地使基因表達沉默的能力,而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢,為基因功能的研究提供了更強有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。對于一些較難轉染的細胞,如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,使用慢病毒載體,能大da提高目的基因或目的shRNA的轉導效率,且目的基因或目的shRNA整合到宿主細胞基因組的幾率大da增加,能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因或目的shRNA的長期、穩(wěn)定表達。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組,使宿主細胞長時間穩(wěn)定表達外源基因。平滑肌細胞轉染試劑盒

常用的病毒載體有腺病毒、逆轉錄病毒和慢病毒。逆轉錄病毒載體只能感ran分裂期細胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色體上,只能進行瞬時感ran。與其它逆轉錄病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感ran非分裂期細胞、容納外源性基因片段大,可以長期表達等xian zhu優(yōu)點。慢病毒不產(chǎn)生任何有效的細胞免疫應答,可作為一種體外基因運輸?shù)墓ぞ摺B《据d體介導的轉基因表達能持續(xù)數(shù)月,且無可觀察到的病理學現(xiàn)象。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感ran。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是三質粒或四質粒包裝系統(tǒng)。其中四質粒系統(tǒng)比三質粒系統(tǒng)在生物安全性上更好一些,所以應用較多。過氧化氫試劑盒幾乎不受環(huán)境pH影響。

慢病毒(Lentivirus)是逆轉錄病毒的一種,它能夠將靶基因導入到一些較難轉染的細胞,如原代細胞等,并且將靶基因隨機整合到宿主的基因組中,從而大da增加了轉染效率,并且能夠在細胞系中穩(wěn)定表達若干代,可以進行穩(wěn)轉細胞株的篩選。因為是隨機整合,也有不確定因素,有些公司還能提供定點整合技術,將靶基因定點整合到基因組特定的部位,從而保證其高效表達并且對細胞不產(chǎn)生隨機整合可能產(chǎn)生的傷害。

慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感ran。

ELISPOT法源自ELISA,又突破傳統(tǒng)ELISA法,是定量ELISA技術的延伸和新的發(fā)展。兩者都是檢測細胞產(chǎn)生的細胞因子或其他可溶性蛋白,它們*大的不同在于:ELISA通過顯色反應,在酶標儀上測定吸光度,與標準曲線比較得出定量的可溶性蛋白總量。ELISPOT通過顯色反應,在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點,可直接通過ELISPOT分析系統(tǒng)對斑點進行計數(shù),從而計算出分泌該蛋白或者細胞因子的細胞的頻率。由于是單細胞水平檢測,需細胞量少, 比ELISA更靈敏。捕獲抗體為高親和力、高特異性、低內du素單抗,在研究者以刺激劑激huo細胞時,不會影響活化細胞分泌細胞因子。但該方法對于操作者的技術要求較高,要保證孔中細胞的均勻性,否則讀板誤差會很大。為進行神經(jīng)系統(tǒng)疾病或神經(jīng)科學相關研究的研究人員提供*** ELISA 試劑盒。

WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒描述:

      通過存在于活細胞中的琥珀酸四唑還原酶將四唑鎓鹽還原成有色甲compounds化合物,提供了測量細胞活力和增殖的靈敏且準確的方法。然而,*常用的四唑鹽MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物]的缺點是由MTT產(chǎn)生的甲dye染料極不溶于水,因此分光光度定量需要額外的提取步驟。ScienCell WST-1細胞活力和增殖測定使用四唑鹽WST-1[2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺苯基)-2H四唑]。WST-1在代謝活性細胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶友好的細胞活力和增殖的比色測量。 ALP陽性,未分化的細胞染成紅色,為監(jiān)測干細胞分化/未分化提供了有效的系統(tǒng)。人血管生成定量PCR芯片試劑盒

熒光素酶(luciferase)是指能催化不同底物發(fā)生氧化使其發(fā)射出熒光的一類酶的總稱。平滑肌細胞轉染試劑盒

第yi代慢病毒載體包含HIV基因組的很大一部分,包括gag、pol及其他幾種病毒蛋白。第yi代慢病毒載體的設計中包含了另一種病毒的包膜蛋白,*常見的是VSV-G。VSV-G的受體為低密度脂蛋白(LDL)受體,普遍存在于多種細胞表面,從而使慢病毒載體可以轉導多種細胞。VSV-G的編碼基因與其他慢病毒基因分散在不同的質粒。第yi代慢病毒載體含有慢病毒輔助基因vif、vpr、vpu和nef以及調控基因tat和rev。其中,Vif、vpr、vpu和nef為慢病毒在體內復制提供了生存/適應性優(yōu)勢,但對于慢病毒在體外的增殖不是必需的;tat和rev是病毒復制所必需的。隨后開發(fā)了缺乏毒力因子vif、vpr、vpu和nef的更安全的第二代慢病毒載體。輔助基因的去除不影響遺傳物質向宿主細胞的轉移。平滑肌細胞轉染試劑盒

上海中喬新舟生物科技有限公司

1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。

2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。

3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。

4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。

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