常見的肝細胞系有HepG2,Hepa1-6等,HepG2是來源于一個15歲白人的肝組織;Hepa1-6來源于小鼠肝,兩者都屬于永生細胞系,當然也有永生細胞系具有的通性缺點,如與正常肝臟細胞相比遺傳物質發生改變,生物學特性會隨著細胞分裂次數的增加而發生遷移等。原代細胞是指從機體獲取組織細胞后的培養。由于離體時間短,因此其能夠保持在體內的生物學特性,與細胞系相比,是更接近體內環境的研究模型。肝臟是作為機體“”的代謝,其組成是極其復雜的,除了肝細胞,還包含眾多內皮細胞、免疫細胞等組分,各類細胞功能各異并相互交流,共同決定肝臟的代謝表型。因此,當我們要研究某一表型究竟是由于肝細胞自身的變化引起的,還是由其他細胞類型所介導的時,使用小鼠肝臟組織是無法說清問題的,使用原代肝細胞能夠避免其他細胞的影響,從而得到更加準確地結論。原代細胞相對于體內實驗,更加可控,可給予的實驗干預也更多。 原代肝細胞廠家直供優勢。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!山東雞 家禽原代肝細胞中喬新舟
原代肝細胞培養物可用作置換組織或。利用原代細胞重建受損組織或替換無功能的細胞或組織的研究正在進行中。培養技術和研究正在胚胎和成人干細胞培養上進行。這些細胞具有分化為許多不同類型的細胞和的能力。通過控制這些細胞的發育和分化,我們也許能夠多種醫學疾病。原代細胞也已普遍用于3D生物打印應用中。干細胞療法:從骨髓、血液或胚胎中分離出來的干細胞涉及原代細胞培養。患者自己的干細胞或來自供體的干細胞在體外生長,以產生足夠的細胞,這些細胞可用于再生組織或替代功能缺陷的細胞。這個領域正在探索中,以設計針對遺傳疾病、脊髓損傷、退行性疾病和的療法。 山東雞 家禽原代肝細胞中喬新舟原代肝細胞的詳細介紹。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
HBV是一種包膜DNA病毒,只能在高度分化的人肝細胞中復制。HBV的復制模板以游離的、共價閉合的環狀DNA(cccDNA)形式存在于細胞的核中。批準使用的核苷(酸)類似物可以有效抑制病毒血癥,但它們無一靶向cccDNA,也就不能有效地徹底乙肝。因此,進行體外研究來鑒定和開發新的抗病毒策略,尤其是沉默或降解cccDNA的策略非常有必要。由于肝細胞是HBV的天然靶細胞,因此新鮮制備或高質量的冷凍人原代肝細胞(PHH)是HBV體外研究的金標準。PHH是非轉化細胞,對HBV高度易感并有效支持HBV復制的所有步驟。但由于從分離后接種到塑料培養皿上它們就開始去分化,在一段時間的體外培養后會失去對HBV的敏感性(即使是在比較好的2D培養條件下)。
目前,NAFLD動物模型和細胞模型仍然是研究NAFLD發病機制及藥物防治的重要手段。動物模型雖然能很好地模擬體內環境,但是存在造模周期長、個體差異大、實驗結果難以控制等問題,而細胞模型個體差異小、影響因素較少、實驗條件可控性強[8-11]。鑒于細胞模型能較好地克服動物模型的不利因素,因此,建立NAFLD體外細胞模型對于研究其發病機制,為進一步防治NAFLD具有重要的理論意義與普遍的實用價值。肝脂肪變性細胞模型是公認的研究NAFLD有效的細胞模型,目前多采用肝細胞株HepG2,通過給予不同比例與濃度的游離脂肪酸(freefattyacids,FFA)混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1),誘導造模[12-13],但因HepG2細胞株來源于腫瘤細胞,與正常生理條件下的肝細胞仍存在著差異[14]。因此采用健康C57BL/6J小鼠的原代肝細胞建立脂肪變性細胞模型,旨在建立一種更接近于臨床的肝細胞脂肪變性模型,為NAFLD的研究奠定基礎。 上海中喬新舟的 原代肝細胞怎么樣?歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
傳代培養:1.倒置顯微鏡下觀察細胞形態,確定細胞是否需要傳代。2.培養液瓶打開后,過酒精燈火焰,置酒精燈火焰周圍。3.拿出直頭滴管,套上橡皮吸頭,過火,放入培養液瓶中。4.打開培養瓶,瓶口過火,將培養瓶內的培養液輕輕倒入廢液缸,用2-3mLPBS洗去殘留的舊培養基。5.培養瓶加入,用量以薄薄蓋滿一層為宜,37℃消化,倒置顯微鏡下觀察到細胞收回突起變圓時立即翻轉培養瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉,加入少量的含血清的新鮮培養基。6.取彎頭滴管反復吹打細胞使其脫壁并分散,再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養基,制成細胞懸液,然后分裝到新培養瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO2氣體的進入,將培養瓶放回CO2培養箱。7.對半貼壁培養細胞,不需胰酶,直接吹打,加入新鮮培養基,然后分裝到各瓶中。 原代肝細胞的定制尺寸。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!山東雞 家禽原代肝細胞中喬新舟
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凍存:1.吸取傳代后的細胞懸液,離心,去除培養液,加入凍存液,分裝凍存管(凍存管內細胞數目一般為(5~10)×106個/ml,2ml凍存管中一般放1~)。2.按步凍存冷凍保存方法一:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之程序降溫機中每分鐘降1~3℃至-80℃以下,再放入液氮長期保存。復蘇:1.取出冷凍管,立即放入37℃水浴箱中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,移入無菌操作臺內。2.打開凍存管,將細胞懸液吸到離心管中。,棄去上清液。4.加適當培養液后將細胞轉移至培養瓶中,37℃培養,第二天觀察生長情況。 山東雞 家禽原代肝細胞中喬新舟
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