如何選用培養(yǎng)基?選擇培養(yǎng)基沒有一定標(biāo)準(zhǔn),有幾點(diǎn)建議可供參考:1.建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基。可以查閱文獻(xiàn),或在購買細(xì)胞株時(shí)咨詢。2.根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選1640;進(jìn)行細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),可選擇IMDM。3.用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),可以用生長(zhǎng)曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cellsandhybridomas鏈接,輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的制作方法難嗎?上海中喬新舟告訴您。天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購買
細(xì)胞培養(yǎng)基的類型動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)可以使用的培養(yǎng)基或人工/合成的培養(yǎng)基混合一些天然產(chǎn)物。天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基只由天然生成的生物液體組成。天然培養(yǎng)基非常有用和方便,適用于多種不同的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。但是,由于缺乏對(duì)這些天然培養(yǎng)基確切成分的認(rèn)識(shí),使用天然培養(yǎng)基的主要缺點(diǎn)是可重復(fù)性差。人工培養(yǎng)基通過人為地加入一些營養(yǎng)物質(zhì)(有機(jī)的和無機(jī)的)、維生素、鹽、O2和CO2氣體、血清蛋白、碳水化合物、輔因子,制備成人工或合成的培養(yǎng)基[1]。不同的人工培養(yǎng)基被分別設(shè)計(jì)用于下面的某個(gè)用途:1)及時(shí)生存(平衡的鹽溶液,有特定的pH和滲透壓)2)長(zhǎng)時(shí)間生存(平衡鹽溶液輔以各種配方的有機(jī)化合物和/或血清)3)不確定生長(zhǎng)4)特定功能。 天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購買上海中喬新舟 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基誠信經(jīng)營。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
L15細(xì)胞培養(yǎng)基L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進(jìn)一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標(biāo)準(zhǔn),有幾點(diǎn)建議可供參考:(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞優(yōu)先的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻(xiàn),或在購買細(xì)胞株時(shí)咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個(gè)CellLineDatabase的工具,選擇你感興趣的細(xì)胞類型,它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。(2)其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。(3)根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選RPMI1640。(4)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)狀態(tài),可以用生長(zhǎng)曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。
pH氣體也是細(xì)胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生能量供給細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和合成各種成分。一些細(xì)胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數(shù)細(xì)胞缺氧不能生存。在開放培養(yǎng)時(shí),一般置細(xì)胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環(huán)境中培養(yǎng)。二氧化碳既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)基的pH有直接關(guān)系。動(dòng)物細(xì)胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,pH值約在7.2~7.4℃在細(xì)胞生長(zhǎng)過程中,隨細(xì)胞數(shù)量的增多和代謝活動(dòng)的加強(qiáng),二氧化碳不斷被釋放,培養(yǎng)液變酸,PH值發(fā)生變化。由于NaHCO3容易分解為二氧化碳,很不穩(wěn)定,致使緩沖系統(tǒng)難以精確地控制。故這一緩沖系統(tǒng)適合密閉培養(yǎng)。HEPES結(jié)合碳酸氫鈉使用,可提供更有效的緩沖體系,主要是防止pH值迅速變動(dòng),但比較大缺點(diǎn)是在開放培養(yǎng)或觀察時(shí)難以維持正常的pH值。造成pH波動(dòng)主要是代謝產(chǎn)生的CO2,在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸,培養(yǎng)基pH很快下降。為解決這一問題,合成培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng),使細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2及時(shí)溢出培養(yǎng)瓶,再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%),與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)。 上海中喬新舟告訴您 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇方法。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對(duì)營養(yǎng)成分、促生長(zhǎng)因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個(gè)方面:1、氨基酸:是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖:培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收能力比較高,半乳糖比較低。體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),幾乎所有的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。3、維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。4、無機(jī)離子與微量元素:細(xì)胞生長(zhǎng)除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基如何選擇?上海中喬新舟告訴您。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購買
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含血清細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性主要是由血清引起的,在轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)貼壁細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)液的粘滯性對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒有多大影響;但在生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)液的粘滯性則直接影響攪拌轉(zhuǎn)速控制及攪拌剪切力對(duì)細(xì)胞造成的損傷程度。表面張力對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有較大的作用,尤其在利用生物反應(yīng)器進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時(shí),攪拌和通氣都會(huì)引起泡沫的產(chǎn)生。對(duì)于含血清培養(yǎng)液,由于血清中多種蛋白的存在,攪拌時(shí)產(chǎn)生的氣泡較多,氣泡的上升運(yùn)動(dòng)對(duì)細(xì)胞的損傷程度還有爭(zhēng)議,但氣泡的破裂對(duì)細(xì)胞有明顯的損傷作用。為降低這種損傷,可通過在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一些保護(hù)劑,降低細(xì)胞-氣體和細(xì)胞-液體的表面張力,減少氣泡的形成。天津子宮上皮細(xì)胞培養(yǎng)基購買
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。