體外培養(yǎng)的上皮細胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應能滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面:1、氨基酸:是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內都含有必需氨基酸。2、單糖:培養(yǎng)中的細胞可以進行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細胞對葡萄糖的吸收能力比較高,半乳糖比較低。體外培養(yǎng)動物細胞時,幾乎所有的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質。3、維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。4、無機離子與微量元素:細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。 上皮細胞培養(yǎng)基如何選擇?上海中喬新舟告訴您。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!山西乳腺上皮細胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。 山西乳腺上皮細胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別上海中喬新舟 上皮細胞培養(yǎng)基值得信賴。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
上皮細胞培養(yǎng)基上皮細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類上皮細胞體外培養(yǎng)設計的適于其生長的培養(yǎng)基。是經滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、、生長因子、微量礦物質和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進正常人類上皮細胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,并為其達到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)。上皮細胞培養(yǎng)基包含500ml基礎培養(yǎng)基,10mll胎牛血清(FBS,)、5ml上皮細胞生長因子(EpiCGS,)、5ml青霉素/鏈霉素溶液(P/S,)。
細胞培養(yǎng)的比較好溫度主要取決于細胞供體的體溫,此外也受到解剖部位體溫差異的影響(例如:皮膚溫度低于骨骼肌的溫度)。與溫度過低相比,細胞培養(yǎng)時溫度過高是更為嚴重的問題;因此,往往將培養(yǎng)箱的溫度設定為略低于比較好溫度。大多數(shù)人和哺乳動物細胞系在36℃至37℃下具有比較好生長狀態(tài)。定期檢查培養(yǎng)細胞的形態(tài)(即:形狀和外觀)對于細胞培養(yǎng)實驗取得成功至關重要。除確認細胞健康狀態(tài)外,每次操作細胞時通過肉眼和顯微鏡檢查細胞還可早期發(fā)現(xiàn)污染征象,避免污染擴散至實驗室其他細胞。細胞變質的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質解離以及細胞質空泡形成。這些變質征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質,或者這些征象只表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。變質嚴重時將會成為不可逆的變化。 上皮細胞培養(yǎng)基的應用范圍十分廣闊。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
經歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子及:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。 上皮細胞培養(yǎng)基怎么選?上海中喬新舟告訴您。山西乳腺上皮細胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
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經典的培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應用普遍的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。其具體的特征及應用如下:1、BME細胞培養(yǎng)基基礎Eagle培養(yǎng)基(BasalMediumEagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。2、MEM細胞培養(yǎng)基又稱低限量Eagle培養(yǎng)基(MinimalEssentialMedium),1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種基本、試用范圍廣的培養(yǎng)基,但因其營養(yǎng)成分所限,針對生產之特定細胞培養(yǎng)與表達時,并不一定是使用效果比較好或者經濟的培養(yǎng)基。 山西乳腺上皮細胞培養(yǎng)基有什么區(qū)別
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1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。