放線菌分離瓊脂

總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養類型復雜，不同微生物對營養物質的需求是不一樣的，因此首先要根據不同微生物的營養需求配制針對性強的培養基。自養型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質、核酸、維生素等復雜的有機物，因此培養自養型微生物的培養基完全可以（或應該）由簡單的無機物組成。例如，培養化能自養型的氧化硫硫桿菌（Thiobacillus thiooxdans）的培養基組成見表3.9。在該培養基配制過程中并未專門加入其他碳源物質，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。Luria-Bertani 培養基是一種常用的細菌培養基，可用于大腸桿菌 E. coli 的培養。放線菌分離瓊脂

通常用心、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養基，并常需加入硫乙醇酸鈉、半胱氨酸、肉渣、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料。在液體培養基中還可加入刃天青或亞甲基藍作為氧化還原指示劑，以觀察培養基的含氧程度。心、腦浸液、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸，能吸收培養基中的氧。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強的還原劑，能消耗溶解在培養基中的氧。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養基中的氧。所以培養基中加入還原劑和吸收材料，目的都是為造成培養基的缺氧環境，使培養基保持較低的氧化還原電勢。此外，還可在培養基表面加一層液體石蠟，以隔絕培養基與大氣的接觸。緩沖蛋白胨水(BPW)常見的細菌類培養基包括營養瓊脂培養基、大腸桿菌培養基、金黃色葡萄球菌培養基等等。

氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分，氨基酸中有12種是細胞本身不合成的，必須由培養液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產物，呈蛋黃色粉末狀，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。膠原是從動物真皮中提取的，具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養基：包括厭氧培養基和細菌L型培養基等。前者是培養專性厭氧菌的培養基，除含營養成分外，還加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢，如皰肉培養基、巰基乙醇酸鈉培養基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型，由于胞內滲透壓較高，故培養基必須采用高滲低瓊脂培養基。

培養基的pH必須控制在一定的范圍內，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同，一般來講，細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由于營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累，會導致培養基pH發生變化，若不對培養基pH條件進行控制，往往導致微生物生長速度下降或（和）代謝產物產量下降。因此，為了維持培養基pH的相對恒定，通常在培養基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時，H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物，培養基pH不會過度降低；如果培養基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物，培養基pH也不會過度升高。培養基種類繁多，根據需求選擇適合的培養基對于成功的微生物培養至關重要。

什么培養基中可以省去加酚紅？酚紅在培養基中用作pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響，可以通過純化技術去除，但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡，影響細胞生長，當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。研究表明，酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應，培養細胞，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細胞檢測時，不使用加有酚紅的培養基。液體培養基普遍應用于微生物菌株的生長、染色及細胞背景下的細胞培養等方面。Endo培養基

液體培養基、固體培養基和半固態培養基是常用的培養基種類。放線菌分離瓊脂

培養基的分類有幾種呢？按培養基組成物質的化學成分區分：1.天然培養基，天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。2.組合培養基，合成培養基是根據天然培養基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如。高氏1號培養基和查氏培養基等。3.半組合培養基 ，指一類主要以化學試劑配制，同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如，馬鈴薯蔗糖培養基。放線菌分離瓊脂

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