貴陽無血清細胞凍存液直銷廠家

無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項：1.將分裝好的細胞凍存管，直接置于-80度冰箱過夜保存，次日投入液氮中保存即可備注：1、凍存過程中，第2步在冰袋附近操作時，低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封，否則在復蘇過程中有可能會炸（1）提前開啟水浴鍋，溫度調節到37（2）將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出，迅速置于水浴鍋中融化，盡量1min融化，時間越短，對細胞影響越小。（3）將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養基中充分混勻，（如細胞冷凍保存液為500ul，則加入到5ml新鮮培養基中，如細胞冷凍保存液位1ml，則加入10ml新鮮培養基中。）（4）混勻后立即離心，800轉，3min即可離心結束后棄上清，加入預溫的新鮮培養液。（5）混勻后分瓶置于二氧化碳培養箱中培養。（二氧化碳濃度根據培養基要求決定，通常為5%【注意事項】細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1～310cells/ml雜交瘤細胞1～310cells/ml某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。貴陽無血清細胞凍存液直銷廠家

無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優勢：傳統的細胞凍存液是使用培養基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），較后才移至液氮罐中進行長期的儲存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡。）南京無血清細胞凍存液廠家推薦凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。

無血清細胞凍存液，通用于人和各種動物細胞株。特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色：不含動物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產品之間有更高的產品質量一致性。成分明確，無批次差異。可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經過費時的程序降溫過程（省時、省力、省錢）。獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復蘇率。即用型，無需現配，即開即用。通用型，適用于凍存各種細胞系，原代細胞。可微量，原位凍存，例如雜交瘤細胞的凍存，省時高效。存儲條件：儲存于4℃以下,質量保障期從產品的生產日期起，為期兩年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時，盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低，推薦將產品分裝成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

無血清細胞凍存液產品用途：1.無血清細胞凍存液可用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。2.無血清細胞凍存液可用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。3.無血清細胞凍存液可用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。無血清細胞凍存液產品原理：無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優先結合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質濃度，減少陽離子進入細胞的數量，無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內外進行雙重保護，較大提高了細胞復蘇存活率。待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合。

細胞凍存的注意事項：1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些，骨髓干細胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開始時，下降速度不能超過－10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大，要依細胞而定，初代培養細胞用DMSO較好，一般細胞可用甘油；用量以較小為好。有人認為人皮膚上皮細胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應再復蘇培養一次，然后再繼續凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍壞。5、注意自身的安全，對于來自人源性或病毒傳染的細胞株應特別小心。操作過程中，應避免引起氣溶膠的產生，小心有毒性試劑例如DMSO，并避免尖銳物品傷人等。無血清凍存液注意事項：若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存。溫州正規無血清細胞凍存液哪里買

不同的凍存方法替代了不同的凍存體系。貴陽無血清細胞凍存液直銷廠家

細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液，4℃預冷（新鮮配制的凍存液會產生大量的熱）；取對數生長期的細胞，用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來；懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中；離心1200rpm，6min；去除上清液，逐漸加入適量預冷的細胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml；在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名；凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min；到達-80℃時，則可迅速放入液氮中。貴陽無血清細胞凍存液直銷廠家