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來源: 發布時間:2025-04-02

外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血病(AML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉移到其他代謝部位或免疫內皮細胞,有利于維持葡萄糖體內平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內皮細胞導致了內皮細胞的損傷促進動脈硬化。分子標記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發現循環EVs的水平上升。預后標志。外泌體提取:基于聚合物的沉淀技術。徐州正規外泌體提取試劑廠家批發價

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外泌體作為近幾年來的研究熱點,受到了科研工作者的青睞及追捧。由于外泌體內攜帶有大量的miRNA,少量lncRNA,Mrna以及DNA蛋白質成為液體活檢的潛力無限的研究對相。所以,獲得純度高、內容物完整的外泌體非常之重要,那么,外泌體的提取方法也顯得尤為重要。一、差速離心法差速離心法可以說是傳統普遍的外泌體提取方法。原理是:首先低速離心以除去細胞和細胞凋亡碎片;隨后,高速離心以去除大囊泡;高速離心以沉淀外泌體。蘇州君欣生物科技有限公司徐州正規外泌體提取試劑廠家批發價超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。

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外泌體(exosomes,Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,實現細胞之間的信息交流及物質交換,并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢,表面由脂質和蛋白質組成,使其可以穿透許多生物膜,提高藥物的運輸效率和靶向性,可以穩定存在于血液中,納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,使得其作為藥物載體的應用受到限制。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。、外泌體的提取、分離方法:超高速離心法。

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外泌體的提取的方式:1、免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。2、PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據,表明PS法可提取相當高純度的外泌體。六是色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不普遍。外泌體提純試劑盒的特色與優勢:無需沉淀試劑,也無需過夜培養。武漢正規外泌體提取試劑價格

外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法。徐州正規外泌體提取試劑廠家批發價

外泌體相關蛋白質與肺病的診斷:近年來,高通量質譜分析被普遍地應用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究,這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況,發現CD151、CD171和TSPAN8這三種蛋白表達不光能區分一些病癥與正常組織,同時也能區分各種肺病的組織亞型。此外,聯合應用這三種蛋白診斷NSCLC的AUC達到0.74。Clark等采用納升液聯用技術(nano-ESI-LC-MS/MS)分析了來自正常支氣管上皮細胞系和兩個攜帶NSCLC細胞系的外泌體的蛋白表達譜,從中篩選出如細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子、溶酶體膜糖蛋白2等多種存在顯著性差異表達的蛋白,同時檢測分析這些蛋白有助于提高NSCLC診斷的敏感性和特異性。由于國內有關外泌體提取試劑的缺乏,我國對外泌體的研究還基本依賴于過程繁瑣的超速離心和進口提取試劑盒。徐州正規外泌體提取試劑廠家批發價

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