如何提高細胞凍存成功率:無菌!無菌!無菌!要折騰嬌貴的細胞寶寶,必須要在無菌超凈環境下才行。超凈工作臺,所有的儀器用品提前滅菌,培養箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細胞的影響經常是開始的時候沒發現,發現的時候已經結束了,所以千萬要小心。除了操作中的各種小細節,還有一個實驗雷區,就是配制細胞凍存液。常見的凍存液配制要遵循培養基+血清+DMSO的成分要求,根據細胞實際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個不小心就又會影響細胞的存活效果。無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。重慶無血清細胞凍存液產品介紹
無血清細胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1)按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2)按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4)加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5)將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6)直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長期冷凍保存。成都無血清細胞凍存液產品介紹無血清凍存液注意事項:若需長期凍存細胞,請轉移至液氮罐中貯存。
產品簡介我們經過長期的實驗研究與反復驗證,研發出一系列新型細胞凍存產品,能有效地提高常規細胞、原代細胞與干細胞的復蘇后存活率與活力。產品質量穩定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復雜、容易污染的傳統凍存方法,專注于后續實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細胞凍存液,所含化學成分明確,無動物源性成分,可一步實現細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質損傷,適用于大多數常規細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。
細胞凍存秘籍:細胞凍存對于大多數動物細胞,通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統。如果沒有程序降溫系統,可以使用程序降溫盒,然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜。雖然這種方法適用于許多細胞系,但不能提供可控的,均勻的或可重復的冷卻,不建議用于珍貴細胞。無論使用哪種冷卻方法,重要的是快速高效地將其傳輸到較終存儲位置。如果轉移不能立即完成,可以將小瓶置于干冰上一段時間。這樣可以避免在轉移過程中發生溫度升高而損害細胞。在這個轉移過程中溫度升高是解凍后影響細胞活力的主要原因。度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中。
細胞凍存液是如何保護細胞的:當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,產生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在較低溫條件下保存。在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內即恢復到常溫,細胞內外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產生,凍存的細胞經復蘇后仍保持其正常的結構和功能。隨著細胞治好以及細胞儲存產業發展,細胞凍存也面臨從科研應用走向產業轉化。合肥正規無血清細胞凍存液
無血清細胞凍存液產品特色:即用型,無需現配,即開即用。重慶無血清細胞凍存液產品介紹
無血清快速細胞凍存液凍存液成分。無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液。保存條件:儲存于4℃以下。質量保障期從產品的生產日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將100ml產品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養的細胞凍存。重慶無血清細胞凍存液產品介紹