倫敦大學學院（UCL）的工藝開發團隊，在細胞藥物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus，LV）生產過程中，比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時間、各階段LV的穩定性等方面的表現，發現在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時間更短，同時用納米顆粒分析（NTA）技術確認M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩定性更高。他們會繼續探究HCD是否影響LV的穩定性，及對LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究，我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產的關鍵機制。ArcticZymes精于規模化生產獨特特性的酶產品，于2005年在證券...

染色質由組蛋白和DNA組成，——147個堿基對的DNA纏繞在8個組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質結構。DNA帶負電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區段。所有這些特點導致宿主DNA殘留（HCD）能吸附很多物質，包括宿主蛋白殘留（HCD）、色譜填料、目的病毒顆粒等，因此，HCD的存在增加了工藝流程的復雜度，同時也降低了病毒顆粒的穩定性。一般來說，生理鹽條件相當于150mM NaCl溶液，而這正是中鹽核酸酶較為適合的條件。黑龍江培養基條件中鹽核酸酶70950-150...

ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產及質控，包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，在符合ISO13485:2016體系基礎上，增加了cGMP質控標準，如microbes、endotoxin、蛋白酶等；同時提供TSE/BSE聲明、無動物源（Animal-Origin Free）聲明、非轉基因聲明等文件協助藥物申報。此外，ArcticZymes的生產場地接受客戶的定期審計，其第三方審計文件已得到國際TOP CDMO及Biotech的認可，并已經成為國際TOP CDMO的供應商。具體文件體系可以跟廠家或對應銷...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶。ArcticZymes目標明確，推進分子研究、診斷和therapeutics領域的發展。30多年來，ArcticZymes只專注于酶學研究，匯集一批志同道合的科學家，在酶學領域追求zhuoyue、勇于創新。ArcticZymes開發創新解決方案，與客戶緊密協作，提升產品品質，從高質量到zhuoyue，達成他們的目標，重新定義生物藥生產的邊界。在ArcticZymes，我們精心設計解決方案，以從未出現的方式推動行業向前發展。在已有工藝中，不需做任何調整，用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸...

細胞基因藥物領域的進展使得對高質量基因轉移技術的需求急劇增加，包括高質量慢病毒載體(LV)的大規模生產。宿主細胞DNA殘留（HCD）是一類主要的工藝相關雜質，對下游純化帶來很大挑戰。根據相關法規要求，需要去除HCD才能達到臨床級LV。HCD去除是通過核酸酶處理聯合下游工藝（DSP）共同實現的。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對HCD去除效率的差別，其下游工藝包含過濾澄清及TFF超濾。M-SAN HQ中鹽核酸酶不需調整培養基任何組分，使用簡單方便；北京M-SAN中鹽核酸酶70950-160宿主...

M-SAN HQ中鹽核酸酶，這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7），且在125 – 250 mM鹽濃度內具有良好活性。在細胞培養液或收獲的培養上清中，不需調整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現良好核酸酶活性。相比傳統的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對HCD的去除更高效、更徹底。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ) 中鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達的重組非特異內切核酸酶，廣泛應用于生產工藝流程中，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。中鹽核酸酶具有純度高（≥...

ArcticZymes Technologies產品大都來源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩定性，使酶產品相對容易失活，簡化工作流程，方便自動化過程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時間，提高反應速度及效率；3. 耐鹽特性，是指大部分酶產品能耐受較高的鹽濃度，拓寬反應體系范圍選擇，在特殊體系的應用場景下具有更為出色的性能表現；4. 獨特特性，極限酶類產品能夠在非常規條件下進行酶促反應，讓一些反應從不可能變為可能。中鹽核酸酶具有純度高（≥99%）、 內毒水平低（

這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7），且在125 – 250 mM鹽濃度內具有優活性。在細胞培養液或收獲的培養上清中，不需調整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現良好核酸酶活性。相比傳統的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對HCD的去除更高效、更徹底。因此，M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體（如慢病毒、逆轉錄病毒及溶瘤病毒等）的生產。ArcticZymesTechnologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。立足北極海洋區，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶，用于分子研究、體外診斷和zhilia...

ArcticZymes Technologies產品大都來源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩定性，使酶產品相對容易失活，簡化工作流程，方便自動化過程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時間，提高反應速度及效率；3. 耐鹽特性，是指大部分酶產品能耐受較高的鹽濃度，拓寬反應體系范圍選擇，在特殊體系的應用場景下具有更為出色的性能表現；4. 獨特特性，極限酶類產品能夠在非常規條件下進行酶促反應，讓一些反應從不可能變為可能。M-SAN HQ中鹽核酸酶生產符合ISO 13485:2016規范，提供相關文件用于申報。江西生理鹽條件中鹽核酸酶70950在...

一般來說，生物生產工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊商標）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發酵生產得到。該酶的適宜反應條件是低鹽濃度范圍（<100mM鹽濃度），且酶活隨著鹽濃度上升而下降，在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失。對于細胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV，LV由于含有脂包膜結構一般都在生理鹽條件下存在，而AAV在高鹽條件下不易團聚、更穩定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下，Benzonase活性受到抑制。M-SAN HQ中鹽核酸酶兼容...

通過三質粒瞬轉體系生產病毒載體，會引入宿主細胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質（如antibiotics、核酸酶等外源物質）等污染，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風險。藥品監管機構一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外，根據雜質來源、工藝以及產品類型不同，也會對HCD限度做不同要求。為了達到這個要求，一般通過核酸酶處理和色譜聯用的方法。一般在細胞培養液裂解/收獲、澄清收獲及超濾濃縮等環節加入核酸酶處理，需要工藝摸索來確認處理方式。ArcticZymes精于規模化生產獨特特性的酶產品，于2005年在證券交易所上市。遼寧M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-...

細胞基因藥物領域的進展使得對高質量基因轉移技術的需求急劇增加，包括高質量慢病毒載體(LV)的大規模生產。宿主細胞DNA殘留（HCD）是一類主要的工藝相關雜質，對下游純化帶來很大挑戰。根據相關法規要求，需要去除HCD才能達到臨床級LV。HCD去除是通過核酸酶處理聯合下游工藝（DSP）共同實現的。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對HCD去除效率的差別，其下游工藝包含過濾澄清及TFF超濾。ArcticZymes的產品開發、生產、銷售和營銷過程均通過ISO13485質量標準的認證。陜西培養基條件中鹽...

ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶（Salt Active Nucleases，SANs）系列產品，主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內切酶，跟Benzonase一樣能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環狀）的DNA和RNA；都來自于深海microbes，通過Pichia pastoris發酵生產得到。這兩款酶的區別在于發揮酶活的適宜鹽濃度不同，——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM，而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM。中鹽核酸酶具有純度高（≥99%）...

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，為生物工藝領域提供了革新性、更高效的方案來解決大規模生產中核酸殘留問題。此前，受限于鹽濃度和核酸酶活性的負調控效應，行業在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡，更多的是讓工藝選擇適應酶。此后，行業可以根據工藝具體需求而選擇更合適的酶產品，既能達到理想的去除效果，又能輕松控制酶用量及綜合成本，真正實現讓酶適應工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業提供更高效率的解決方案。ArcticZymes致力于提供高質量產品，中鹽核酸酶具有好的批間一致性、穩定可靠的質量。天津中鹽核酸酶70950對...

核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前，生物制藥行業對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代，而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調整，同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA（HCD）的去除效果更好、病毒載體得率更高。經過工藝優化后，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2，且HCD去除效果及產品得率更高。US FDA指南要求：重組biologics終產品中，核酸雜質含量低于...

殘留的宿主DNA是生產中產生的雜質，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風險。相關研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風險等級越高。因此，各國監管機構對其提出了嚴格要求。美國食品藥品監督管理局（FDA）在《關于人類基因zhiliao新產品生產指導文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp。2022年5月，國家藥品監督管理局藥品評審中心（CDE）發布的《體內基因藥物產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）》中也明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進行控制，建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下。相比...

對于含包膜的病毒載體，如慢病毒LV、逆轉錄病毒RV等，在細胞培養上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶，作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶，所以，M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產的更好選擇。優勢在于：1. M-SAN HQ兼容多種細胞培養體系，在細胞培養鹽濃度條件下具有更優活性；2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快，縮短孵育時間；3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質到更小片段，簡化下游工藝流程；4. 相比Benzonase，M-SAN HQ用量減少1/2-2/3，降低了酶用量及生產成本。ArcticZymes致力于提供高質量產品，中鹽核酸酶具有好的批間一致性、穩定可靠的質量...

這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7），且在125 – 250 mM鹽濃度內具有優活性。在細胞培養液或收獲的培養上清中，不需調整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現良好核酸酶活性。相比傳統的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對HCD的去除更高效、更徹底。因此，M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體（如慢病毒、逆轉錄病毒及溶瘤病毒等）的生產。ArcticZymesTechnologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。立足北極海洋區，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶，用于分子研究、體外診斷和zhilia...

經典的慢病毒載體（LV）的生產工藝如下，——三質粒系統瞬時轉染HEK293細胞系，轉染24小時后LV由轉染陽性細胞生產并排出到培養上清液中；收獲上清培養液后，加入核酸酶去除HCD污染，通過澄清步驟去除大的細胞碎片等雜質；下游純化步驟分離LV載體，純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心；純化后的LV病毒顆粒經過無菌過濾，更換到優化后的配方中，灌裝并冷凍保存。每批Car-T生產時取對應量的LV病毒，切忌反復凍融，否則LV病毒會失活。ArcticZymes Technologies的研發基于北極海洋區的自然資源；安徽M-SAN中鹽核酸酶70950-202細胞基因藥物領域的進展使得對高質量基...

逆轉錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細胞基因組，并穩定持久地表達，已經在批準的CAR-T產品和許多臨床產品中得到應用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV，gamma逆轉錄病毒)作為基因轉移載體醫治兒童的X性染色體連鎖嚴重聯合免疫缺陷（SCID-X1）。目前上市的6個細胞藥物產品全部采用逆轉錄病毒（3個為gamma逆轉錄病毒載體，3個慢病毒載體）作為基因轉移載體。逆轉錄病毒載體目前常用的主要有兩個：gamma逆轉錄病毒載體(Retroviral vector,RV)和慢病毒載體(Lentivirus vector,...

市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規格，分別是25kU、500kU及5MU，分別滿足研發初期及大規模生產各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在99%以上。基于ArcticZymes Technologies的30年的酶學開發及大規模生產經驗，M-SAN HQ的生產體系穩定，產品純度高，批次一致性好，無蛋白酶活性。廠家開發出特異的緩沖液體系，使M-SAN HQ保存起來更加穩定，-15℃ - -30℃條件下保存4年沒有活性下降。研究數據表明，經過5-6次的反復凍融，M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒有明顯變化。相比于全能核酸酶，在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶將染色質DNA剪切...

染色質由組蛋白和DNA組成，——147個堿基對的DNA纏繞在8個組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質結構。DNA帶負電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區段。所有這些特點導致宿主DNA殘留（HCD）能吸附很多物質，包括宿主蛋白殘留（HCD）、色譜填料、目的病毒顆粒等，因此，HCD的存在增加了工藝流程的復雜度，同時也降低了病毒顆粒的穩定性。M-SAN HQ ELISA kit檢測產品操作簡單，1.5–2hr即可完成檢測。四川M-SAN HQ中鹽核酸酶70950-202...

病毒載體作為細胞藥物生產的關鍵原材料，直接關系到細胞產品質量。載體質量的控制和工藝穩定性和批間一致性都是關系到產品能否產業化的關鍵。在生產純化過程中，需要去除上游過程中的培養基成分、誘導劑、宿主蛋白和核酸等雜質，但是由于逆轉錄病毒顆粒比較大，高異質表面糖蛋白，而且活性易于受剪切影響，對下游純化提出了巨大的挑戰。目前病毒載體純化方法包括超速離心、離子交換層析、分子排阻層析、親和層析、滲濾等。各種方法各有利弊，就產業化而言，離子交換純化效果比較好，條件易于摸索，易于規模放大。M-SAN HQ ELISA kit檢測產品操作簡單，1.5–2hr即可完成檢測。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶在干細胞醫治領...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)；立足北極海洋區，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶，用于分子研究、體外診斷和藥物領域。以其產品的獨特性質及超過30年的生產經驗積淀，ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領域客戶的肯定及大力支持，ArcticZymes產品線已用于診斷產品及生物藥物生產中。2005年，ArcticZymes在Olso證券交易所上市，并且持續得到挪威國家基金的支持。ArcticZymes致力于提供高質量產品，中鹽核酸酶具有好的批間一致性、穩定可靠的質量。上海培...

大多數研究級別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進，特別是純度方面的改進，基于離心/色譜聯用的純化方法。例如，Kutner等評估了組合純化/濃縮方法。蔗糖緩沖的超速離心結合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率，而相反的組合則獲得了77.6%的收率。在兩種方法中，濃縮都超過了100倍，病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒)。在150mM NaCl條件下，M-SAN HQ中鹽核酸酶的酶切活性達到常規核酸酶的5倍左右。甘肅等滲條...

除了獲得載體的滴度及產量，生產慢病毒更關心的指標主要是各種污染物的去除。總DNA污染的去除百分比在99.1-99.84%，總蛋白污染物的去除百分比在99.85-99.9%。針對宿主細胞的DNA（HCD）及蛋白（HCP），有報道其去除百分比分別為99.8%和99.4%。因為不僅殘存的DNA可能是個問題，而且DNA的大小以及由此引起的可能轉移整個有功能的開放閱讀框也是問題，因此監管機構對殘存DNA污染的分子量上限的要求越來越高。例如，FDA的指南‘生產用于傳染病適應癥的病毒疫苗的細胞基質和其他生物材料的特性和鑒定’中說明，殘留的細胞宿主的DNA片段不能超過一個功能基因的長度，估計在200bp左右。...

大規模生產階段，AAV/LV載體生產流程跟抗體、疫苗類藥物的生產類似，主要包含上游培養、下游純化及制劑部分。上游培養分為質粒開發、細胞擴增、三質粒共轉染及病毒載體生產等步驟。下游純化分為細胞裂解釋放AAV病毒顆粒（可以通過去污劑、機械作用、高滲或凍融操作等）or收獲細胞上清液得到含LV病毒原液、加入核酸酶以減少宿主細胞核酸污染、澄清是通過離心或過濾等方法去除細胞碎片和雜質等、超濾濃縮以減少后續色譜純化體系、親合及離子交換等純化得到高純度病毒載體。制劑部分主要是超濾更換緩沖液、過濾除菌及制劑灌裝等。ArcticZymes成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟。安徽培養基條件中鹽核...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)；立足北極海洋區，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶，用于分子研究、體外診斷和藥物領域。以其產品的獨特性質及超過30年的生產經驗積淀，ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領域客戶的肯定及大力支持，ArcticZymes產品線已用于診斷產品及生物藥物生產中。2005年，ArcticZymes在Olso證券交易所上市，并且持續得到挪威國家基金的支持。M-SAN HQ ELISA kit檢測產品操作簡單，1.5–2hr即可完成檢測。甘肅M-SAN...

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，為生物工藝領域提供了革新性、更高效的方案來解決大規模生產中核酸殘留問題。此前，受限于鹽濃度和核酸酶活性的負調控效應，行業在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡，更多的是讓工藝選擇適應酶。此后，行業可以根據工藝具體需求而選擇更合適的酶產品，既能達到理想的去除效果，又能輕松控制酶用量及綜合成本，真正實現讓酶適應工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業提供更高效率的解決方案。Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ），中文名稱中鹽...

大規模生產階段，AAV/LV載體生產流程跟抗體、疫苗類藥物的生產類似，主要包含上游培養、下游純化及制劑部分。上游培養分為質粒開發、細胞擴增、三質粒共轉染及病毒載體生產等步驟。下游純化分為細胞裂解釋放AAV病毒顆粒（可以通過去污劑、機械作用、高滲或凍融操作等）or收獲細胞上清液得到含LV病毒原液、加入核酸酶以減少宿主細胞核酸污染、澄清是通過離心或過濾等方法去除細胞碎片和雜質等、超濾濃縮以減少后續色譜純化體系、親合及離子交換等純化得到高純度病毒載體。制劑部分主要是超濾更換緩沖液、過濾除菌及制劑灌裝等。M-SAN HQ ELISA kit檢測產品能定量檢測該核酸酶，與中鹽核酸酶搭配用在medicin...