醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過(guò)表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)...
免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包。眾所周知,抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,制備特異性抗體,再用這種抗體(第1抗體)作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過(guò)氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物,將抗原放大,由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無(wú)色的,因此,還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來(lái)。通過(guò)抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,在顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)...
目前幾種常用免疫組化方法簡(jiǎn)單介紹 1)免疫熒光方法是**早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。 英瀚斯生物,專業(yè)免疫組化技術(shù)方案。 2)免疫酶標(biāo)方法免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)。基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色...
英瀚斯生物為您整理免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟 1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h,脫蠟至水,用PBS沖洗三次,每次5min。 2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復(fù),中火至沸后斷電,間隔10min低火至沸。 3、自然冷卻后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%過(guò)氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。 5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。 6、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過(guò)夜。 7、PBS洗3次,每次5min。 8、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種...
免疫組化如何才能充分脫蠟? (1)蠟不溶于水,如果脫蠟不干凈,少許蠟存留于切片上,將會(huì)引起染色不均勻、陽(yáng)性物時(shí)隱時(shí)現(xiàn)、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問(wèn)題,切片在染色前必須徹底脫蠟,目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,因它脫蠟力強(qiáng),脫蠟時(shí)間較短; (2)脫蠟的時(shí)間要根據(jù)季節(jié),室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天,室溫較高,脫蠟試劑也新鮮,則脫蠟時(shí)間不需很多,3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,室溫較低,脫蠟試劑也較陳舊,則脫蠟時(shí)間需要延長(zhǎng),10-20分鐘或更長(zhǎng)。 (3)當(dāng)天切的切片,燒烤2小時(shí)后進(jìn)行染色,切片帶有溫度進(jìn)行脫蠟這將可加速脫蠟的過(guò)程,如果預(yù)先切好烤好的...
免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。 免疫組化就找英瀚斯,高效率,高質(zhì)量。 免疫組化常用的染色方法 根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 大鼠、小鼠組織免疫組化...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過(guò)高:一抗?jié)舛冗^(guò)高是常見(jiàn)的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說(shuō)明書進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)。現(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...
免疫組化的定量分析怎么做? 免疫組化的定量分析是通過(guò)圖像分析軟件對(duì)顯色結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估。免疫組化常用的方法有光密度分析和陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)。光密度分析是通過(guò)測(cè)量顯**域的光密度值,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)是通過(guò)計(jì)數(shù)顯色陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)量,評(píng)估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。定量分析需要考慮多個(gè)因素,如顯色強(qiáng)度、背景信號(hào)和切片厚度。此外,免疫組化定量分析的結(jié)果通常只能進(jìn)行半定量分析,不能提供***的定量數(shù)據(jù)。 英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包,多種病理染色熟練掌握,可做免疫組化!靠譜免疫組化外包免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說(shuō)明。除了生物學(xué)來(lái)源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也...
做免疫組化時(shí)如何選擇一抗? 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過(guò)封閉等避免)。 2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標(biāo)明...
免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。 免疫組化就找英瀚斯,高效率,高質(zhì)量。 免疫組化常用的染色方法 根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 做免疫組化意味什么?青...
免疫組化的局限性:在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在病理診斷和醫(yī)療中已有了很重要的位置,對(duì)于cancer診斷、鑒別診斷、分類及諸多方面產(chǎn)生了重大的影響。但是免疫組化技術(shù)還存在著缺陷和不足,作為病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員不僅要充分認(rèn)識(shí)到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來(lái)的誤區(qū),這就要求病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員在工作中不斷學(xué)習(xí)與研究,在實(shí)際操作中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),分析失敗原因,努力實(shí)現(xiàn)操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床醫(yī)療中的指導(dǎo)作用。大鼠、小鼠組織免疫組化,找英瀚斯生物。湖南小鼠免疫組化怎么樣病理醫(yī)師日常工作中...
免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么? (1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過(guò)程中,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過(guò)抗原修復(fù),使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測(cè)率。 (2)修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種,高壓修復(fù)、微波修復(fù)、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,大量的:中性的、高pH的等)。 (3)微波修復(fù),我們一般用6min*4次,效果不錯(cuò)。 關(guān)于免疫組化的更多問(wèn)題詳解,關(guān)注英瀚斯生物。 免疫組化常見(jiàn)問(wèn)題原因分析!什么是免疫組化外包細(xì)胞屬性的判定,免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用。通過(guò)...
免疫組化的DAB顯色時(shí)間如何把握? 1、DAB顯色時(shí)間不是固定的,主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間,到出現(xiàn)淺棕色本底時(shí)即可沖洗; 2、DAB顯色時(shí)間很短(如幾秒或幾十秒)就出現(xiàn)很深的棕褐色,這很可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng),需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時(shí)間; 英瀚斯生物病理平臺(tái),一站式解決各種染色需求。 3、此外,若很短時(shí)間就出現(xiàn)背景很深,還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全,需要延長(zhǎng)封閉時(shí)間; 4、DAB顯色時(shí)間很長(zhǎng)(如超過(guò)十幾分鐘)才出現(xiàn)陽(yáng)性染色,一方面可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)低或孵育時(shí)間過(guò)短(比較好一抗4度過(guò)夜);另一方面就是封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。 ...
免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來(lái)檢測(cè)組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來(lái)自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,簡(jiǎn)稱ICC)。這兩個(gè)詞大家經(jīng)常混著用,看著好像差不多,但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。IHCvsICC對(duì)于IHC,組織是來(lái)自患者或動(dòng)物,經(jīng)過(guò)冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過(guò)這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對(duì)于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個(gè)細(xì)胞來(lái)染色。ICC的來(lái)源可以是細(xì)胞懸液,來(lái)自患者或動(dòng)物(如...
免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。做免疫組化的目的是什么?青海什么是免疫組化怎么選擇 免疫組化實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)總結(jié): ?本實(shí)驗(yàn)室所用切片一般是石蠟切片。 ?烘片:使蠟片水分蒸發(fā),石蠟軟化,組織切片牢固貼在玻片上;烘片至跟...
免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。 免疫組化就找英瀚斯,高效率,高質(zhì)量。 免疫組化常用的染色方法 根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對(duì)某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 有沒(méi)有能做免疫組化的實(shí)...
免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來(lái)檢測(cè)組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來(lái)自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,簡(jiǎn)稱ICC)。這兩個(gè)詞大家經(jīng)常混著用,看著好像差不多,但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。IHCvsICC對(duì)于IHC,組織是來(lái)自患者或動(dòng)物,經(jīng)過(guò)冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過(guò)這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對(duì)于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個(gè)細(xì)胞來(lái)染色。ICC的來(lái)源可以是細(xì)胞懸液,來(lái)自患者或動(dòng)物(如...
免疫組化的特點(diǎn): 1)特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí),才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。 2)敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來(lái)越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。 3)定位準(zhǔn)確、...
免疫組化在臨床應(yīng)用中,還能及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶。英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺(tái)。采用常規(guī)病理方法難以檢出的實(shí)體瘤轉(zhuǎn)移稱為微小轉(zhuǎn)移灶。在常規(guī)組織切片中,辨別單個(gè)或幾個(gè)轉(zhuǎn)移性cancer細(xì)胞很難,淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些cancer的早期轉(zhuǎn)移有時(shí)也不易區(qū)別,而采用免疫組化方法,有助于及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小(cancer)轉(zhuǎn)移灶。對(duì)乳腺cancer而言主要是腋窩淋巴結(jié)的檢測(cè),淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移患者預(yù)后差,這對(duì)進(jìn)一步醫(yī)療和預(yù)后判斷十分有意義。免疫組化IHC詳細(xì)介紹!河北病理免疫組化推薦免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對(duì)于反應(yīng)性增生還是cancer性...
醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過(guò)表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)...
免疫組化的特點(diǎn): 1)特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí),才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。 2)敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來(lái)越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。 3)定位準(zhǔn)確、...
免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)。基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。英瀚斯生...
免疫組化的特點(diǎn): 1)特異性強(qiáng)。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí),才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。 2)敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬(wàn)倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來(lái)越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。 3)定位準(zhǔn)確、...
免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹: 英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟: 1、SP三步法 1)石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。 2)0.3%或3%H2O2去離子水(無(wú)色液體)孵育10-30分鐘,以滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。 3)蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘 4)候選步驟:采用抗原修復(fù):微波(建議30分鐘內(nèi)4次中火)、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻,再用3分鐘×3次. 5)血清封閉:室溫15-30分鐘,盡可能與二抗來(lái)源一致。傾去,勿洗。 6)滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過(guò)夜(比較好復(fù)溫)。PBS沖洗,3分鐘×5次。 7)滴加生物素標(biāo)記的...
免疫組化的局限性:在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在病理診斷和醫(yī)療中已有了很重要的位置,對(duì)于cancer診斷、鑒別診斷、分類及諸多方面產(chǎn)生了重大的影響。但是免疫組化技術(shù)還存在著缺陷和不足,作為病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員不僅要充分認(rèn)識(shí)到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來(lái)的誤區(qū),這就要求病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員在工作中不斷學(xué)習(xí)與研究,在實(shí)際操作中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),分析失敗原因,努力實(shí)現(xiàn)操作規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床醫(yī)療中的指導(dǎo)作用。哪里可以做免疫組化?寧夏小鼠免疫組化注意事項(xiàng) 免疫組化結(jié)果要如何分析? ...
免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,進(jìn)而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,設(shè)置對(duì)照,判讀結(jié)果,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過(guò)程存在多個(gè)環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測(cè)結(jié)果,如抗原保存,蛋白酶消化,增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果。有沒(méi)有能做免疫組化的實(shí)驗(yàn)外包公司?效果好一點(diǎn)的。組織免疫組化 免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些? 1、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以...
臨床應(yīng)用中,藥物靶點(diǎn)免疫組化,英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),一站式醫(yī)學(xué)科研平臺(tái)。免疫組化及分子病理學(xué)方法在疾病診斷中只只起輔助醫(yī)療的作用,而藥物病理學(xué)是用病理學(xué)的方法確定藥物醫(yī)療的靶點(diǎn)、評(píng)價(jià)藥物醫(yī)療的療效、預(yù)測(cè)藥物醫(yī)療的反應(yīng),因此藥物靶點(diǎn)免疫組化屬“單獨(dú)的診斷”。因此對(duì)于對(duì)照的設(shè)置、質(zhì)量的控制均需要更高的要求,如對(duì)試劑的要求,不同于一般的診斷試劑,應(yīng)按對(duì)藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫(yī)療的依據(jù)。做好免疫組化,你需要了解這些!貴州做得好的免疫組化哪家好免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在...
細(xì)胞屬性的判定,免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用。通過(guò)特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,來(lái)判定細(xì)胞的屬性,確定cancer的來(lái)源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記,CK陽(yáng)性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽(yáng)性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見(jiàn)于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng)性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽(yáng)性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動(dòng)蛋白(Actin)陽(yáng)性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽(yáng)性;血管源性cancer...
免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)。基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。臨床樣本...
免疫組化如何才能充分脫蠟? (1)蠟不溶于水,如果脫蠟不干凈,少許蠟存留于切片上,將會(huì)引起染色不均勻、陽(yáng)性物時(shí)隱時(shí)現(xiàn)、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問(wèn)題,切片在染色前必須徹底脫蠟,目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,因它脫蠟力強(qiáng),脫蠟時(shí)間較短; (2)脫蠟的時(shí)間要根據(jù)季節(jié),室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天,室溫較高,脫蠟試劑也新鮮,則脫蠟時(shí)間不需很多,3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,室溫較低,脫蠟試劑也較陳舊,則脫蠟時(shí)間需要延長(zhǎng),10-20分鐘或更長(zhǎng)。 (3)當(dāng)天切的切片,燒烤2小時(shí)后進(jìn)行染色,切片帶有溫度進(jìn)行脫蠟這將可加速脫蠟的過(guò)程,如果預(yù)先切好烤好的...