鼠尾膠原包被培養板:胎干細胞在體外可誘導分化為血管內皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一。目的:探討建立定向誘導人胚胎干細胞向血管內皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層上培養人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉移到鼠尾膠原包被的培養板,貼壁24-48h后,培養基換為含不同輔助因子和內皮細胞生長添加劑的EGM-2內皮細胞培養基。結果與結論:①在EGM-2內皮細胞培養基誘導下,細胞逐步表達內皮細胞特異性標記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細胞表達內皮細胞特異性標記VE-cadherin、CD31...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul 10×PBS或10×培養液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液...
一種海貍鼠尾膠原手術縫合線制備方法,其特征在于,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,用無花果蛋白酶進行酶解處理,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,然后用乙酸溶液溶脹,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網過濾,除去雜質及不溶脹物,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機的紡絲液貯罐中,用氮氣擠壓入含有pH=8-11、質量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經過質量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,再經過假捻器加捻,合股后再進入含有pH=9-11、質量濃度為0.8-1.2...
膠原蛋白(Collagen)是結締組織和內臟部位外基質的主要成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為普遍。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型,I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構,被普遍用于多種細胞的培養基質,如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外,I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織態的發生等方面也具有重要應用。注意事項:1) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2) 整個操作請于冰上進行,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。3) 整個操作請在無菌環境下無菌操作,避免...
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速,所得產品的分子量是連續的,適用于醫用生物材料及原料的制備,但產品得率低,設備腐蝕嚴重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3 %的醋酸溶液在4 ℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。昆明正規鼠尾膠原廠家膠原蛋白(Collagen...
膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速,所得產品的分子量是連續的,適用于醫用生物材料及原料的制備,但產品得率低,設備腐蝕嚴重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3 %的醋酸溶液在4 ℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。南京正規鼠尾膠原銷售廠家簡介:鼠尾I型...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 (均需要無菌、 預冷) 10mg/L 酚紅用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠...
鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬 片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。通 過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于 培養瓶內。 實驗設備及材料: 大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理 鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。 實驗內容: 1、制備鼠尾膠原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。布鼠尾膠原...
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調節pH = 6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀; 2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調節PH = 6.5 ;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理; (8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產品經進一步處理得到...
鼠尾膠原,10mg包裝,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,容量瓶配制比較準確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z準確),加入盛膠原的瓶中,輕輕顛倒,不要震蕩,蛋白 容易起泡。幾分鐘即可,蛋白質非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大點的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一檔就行,避免加入氣泡。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷凍。膠原蛋白是結締組織和內臟部位外基質的主要成分。成都正規鼠尾膠原產品介紹鼠尾膠原:1實驗制備:...
I型鼠尾膠原是借鑒Navneeta Rajan, Jason Habermehl法,經過乙酸抽提、離心、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度、高活性膠原蛋白,屬于醫藥級別產品,可用于包被細胞培養器皿(單分子層包被),適合多種類型細胞的貼壁如肝臟細胞、神經節細胞、胚胎細胞、肌細胞、肺細胞、神經鞘細胞等。I型膠原蛋白包被細胞培養板,規格為6/24孔板,表面經I型膠原蛋白包被,可以很好的降低蛋白質的吸附。使用這種細胞培養板培養細胞,可以獲得良好的細胞貼壁率,細胞增殖速度快,形態均一,細胞培養成功率高。本品可用于細胞培養皿的包被,特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養。昆明正規鼠尾膠原廠家推薦膠原蛋白...
鼠尾膠原實驗應用:探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,觀察全細胞膜片鉗實驗中,自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用。結果無鼠尾膠原時,前庭毛細胞懸浮于外液,不宜封接;有鼠尾膠原時,前庭毛細胞貼附于培養皿底壁,易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。制備鼠尾膠原:將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中。北京鼠尾膠原推薦廠家鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料:大鼠尾巴、剪...
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M 的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數量的膠原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。...
利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構成膠原纖維。然后,將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6 d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2 d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6 d后,膠原纖維內部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。 結論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維,經礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分...
利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。 方法 通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構成膠原纖維。然后,將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6 d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。 結果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2 d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6 d后,膠原纖維內部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。 結論 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維,經礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分...
膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋,其中每 3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為 3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區,這些極性區能和重金屬離子結合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結構。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。膠原蛋白是...
膠原蛋白按其應用可以分為食品級、一般級、醫藥級。食用膠原一般來源于動物的真皮、肌腱和骨膠原.其中皮膠原是主要的食用膠原。食用級膠原通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。膠原的獨特品質.使得它在許多食品中用作功能物質和營養成分,具有其它替代材料無可比擬的優越性:①膠原大分子的螺旋結構和存在結晶區.使其具有一定的熱穩定性;②膠原天然的緊密的纖維結構,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發現具有這品質。將鼠尾膠原加入到0...
鼠尾膠原,是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。有點學術了,聽不懂···貼壁,有什么意義?分散的單一細胞培養能夠比較理想地反映細胞的具體生物特性。選擇合適的培養基,可以解決培養中細胞脫落和細胞重聚的現象。鼠尾膠原,是一種細胞支持物,它是細胞外基質的主要成份,可直接或間接參與細胞的附著。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養皿的包被,特別適合普...
鼠尾膠原的提取步驟:配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液(用鹽酸將其PH值調至7.5) 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理鹽水中,稱重,再倒掉生理鹽水,酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,(1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心,(8000rpm 5min) 其上清,留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物,加入消毒過的攪拌 子,冷房攪拌數天,得絮狀膠原。 注意所有和膠原有關的操作都在冰上進行\ Rat ...
膠原蛋白的功效:1.膠原蛋白可以作為一種補鈣食品,膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運輸鈣到骨細胞的運載工具,骨細胞中的骨膠原是羥基磷灰石的粘合劑,它與羥基磷灰石共同構成了骨骼的主體。因此,只要攝入足夠的膠原蛋白,就能保證正常機體鈣質的攝入量,膠原蛋白可制成補鈣的保健食品。2.膠原蛋白在人體運動鍛煉的過程中,可以促使身體消耗大量脂肪達到的效果。但需要注意的是膠原蛋白本身是沒有作用的,它只能在運動呢鍛煉是增加脂肪的消耗量。3.膠原蛋白是身體免疫作用中負責重要功能的阿米巴細胞清掃異物的感知器,因此對預防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C能、克制細胞、活化細胞機能、活化筋骨、治好關節炎及酸痛。成纖維細胞...
鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1. 主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,用75%的乙醇浸泡5 min。將尾巴剪開,去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,按每克肌鍵50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,4 ℃放置一周,然后以2186×g離心20 min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成膠凍狀凝膠,置于冰箱4 ℃保存...
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養方法。方法:原代培養人皮膚成纖維細胞,制備鼠尾膠原,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當的比例下混合后形成凝膠構建類似物。結果:形成的類似物中成纖維細胞生長狀態良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結論:①利用鼠尾膠原可以構建類似物,該模型是進行皮膚部位型培養和制作復合皮的關鍵與基礎;②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性,它是研究成纖維細胞與細胞外基質之間以及細胞之間相互作用的良好模型。在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。北京正規鼠尾膠原廠家直銷實驗應用:鼠尾...
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,會冷凍起來,并提取尾巴里的筋腱。然后,將筋腱切成小塊,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領域,鼠尾膠原蛋白用于生產明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質地。它還用于生產膳食保健品,據說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進關節健康。免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。鄭州正規鼠尾膠原鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代...
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化鉀 100 mL,用1 mol/L 氫氧化鈉調節酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構吸取膠原10μL至小培養皿中,倒入0.5 mL自組裝液,室溫放置20 min。予自組裝液自組裝24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培養皿中,將自組裝24 h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10 mmol/L 二水氯化鈣+150 mmol/L氯化鈉+50 mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入...
實驗應用:探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,觀察全細胞膜片鉗實驗中,自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用。結果無鼠尾膠原時,前庭毛細胞懸浮于外液,不宜封接;有鼠尾膠原時,前庭毛細胞貼附于培養皿底壁,易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用。結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹。溫州鼠尾膠原生產廠家生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100ul 10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用...
鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對角膜上皮細胞增殖的影響:目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質對體外培養角膜上皮細胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質包被培養器皿,以普通培養器皿作對照,培養角膜上皮細胞,觀察細胞形態,進行細胞計數并描繪細胞生長曲線,比較不同基質對角膜上皮細胞的增殖作用。結果使用基質包被的培養器皿培養角膜上皮細胞,細胞增殖速度較普通組快,細胞形態、活力和長勢比普通組更佳,促進增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結論鼠尾膠原可促進角膜上皮細胞增殖,且增殖效果優于多聚賴氨酸和明膠。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且...
提取鼠尾腱膠原工藝的優化:單因素分析,膠原提取率在一定參數范圍內隨浸提時間、乙酸濃度及料液比的增加而增加。正交試驗,鼠尾腱膠原提取的較佳工藝參數為浸提時間72h、乙酸濃度0.5mol·L-1、料液比為1∶40。SDS-PAGE電泳顯示,樣品為Ⅰ型膠原,單寧酸沉淀實驗顯示膠原降解程度低,傅里葉紅外光譜顯示膠原結構完整。樣品氨基酸含量測定符合膠原蛋白的成分特征。中性膠原溶液在37℃時能夠形成固態膠原凝膠,膠原凝膠經過碳化二亞胺(EDC)交聯后,掃描電鏡下顯示內部相互連接,構成孔徑適中的蜂窩狀多孔結構。結論:成功建立并優化鼠尾腱膠原蛋白的提取工藝,得出浸提時間、乙酸濃度及料液比等因素的較佳工藝參數,...
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,真空冷凍干燥備用;(2)凍干鼠尾腱經低溫凍干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,期間不斷攪拌,防止凍結成塊,得到膠原溶脹液; (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,鼠尾腱與蛋白酶質量比為50: I?100: 1,在4°C,48?74小時酶解,期間間歇性攪拌; (5)將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白...
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料。膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料。重慶鼠尾膠原供應商鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:...