作為哺乳動物NAD+合成的前體，煙酰胺單核苷酸能夠有效改善衰老MSCs的線粒體功能并YiZhiMSCs衰老。為了探究煙酰胺單核苷酸的作用是否與細胞內NAD+含量及NAD+/NADH比值有關，對煙酰胺單核苷酸處理后的細胞內NAD+含量及NAD+/NADH比值進行了測定。如圖13所示，與LP組相比，LP+煙酰胺單核苷酸組中細胞內NAD+含量明顯增加(P<0.001)，NAD+/NADH比值也XianZhu升高(P<0.01)。提示煙酰胺單核苷酸可能通過上調NAD+含量及NAD+/NADH比值發揮其對線粒體功能及MSCs衰老的調節作用。A.NAD+含量檢測結果顯示，LP+煙酰胺單核苷酸組細胞內NAD+含量增加。B.NAD+/NADH比值測定結果顯示，LP+煙酰胺單核苷酸組細胞內NAD+/NADH比值升高。**P<0.01***P<0.001。煙酰胺單核苷酸能夠穿過線粒體膜進入線粒體內，在煙酰胺單核苷酸AT3酶的作用下能夠進行NAD+的生物合成。陜西煙酰胺單核苷酸專業生產
美國的Huizenga發明了一組包含NAD+、煙酰胺單核苷酸、NR等活性成分的組合物，可用于Kang Shuai老和抗氧化調理。吉田大學的Akihiro等發明了煙酰胺單核苷酸和NR及其鹽類為原料的藥物，可用于調理角膜障礙。華盛頓大學的Imai研發了用于改善年齡相關的肥胖癥、GaoXueZhi、2型糖尿病的調理方法和以煙酰胺單核苷酸為活性成分的藥物。Douglas等發明了評估和調理血管內皮障礙的方法和以煙酰胺單核苷酸作為活性成分的藥物。Michael等研發了煙酰胺單核苷酸調節劑(一種神經保護藥物)，可用于調理神經變性疾病。煙酰胺單核苷酸在食品中的應用煙酰胺單核苷酸在天然食物中普遍存在，蔬菜、ZhenJun、肉類和蝦中都發現了煙酰胺單核苷酸。煙酰胺單核苷酸多少錢一噸煙酰胺單核苷酸改善衰老的作用可能與細胞內NAD+含量及Sirt3表達上調有關。
進一步對各組細胞的線粒體功能進行了測定。結果顯示，3-TYP能夠明顯下調煙酰胺單核苷酸所致的細胞內ATP含量的增加(P<0.001)，并且能夠逆轉煙酰胺單核苷酸所致的ROS水平的降低(P<0.01)。通過JC-1染色發現，煙酰胺單核苷酸使細胞的線粒體膜電位增加，而加入3-TYP后，細胞的線粒體紅色熒光減弱，綠色熒光增強，削弱了煙酰胺單核苷酸所致的線粒體膜電位的升高。以上結果說明，Sirt3選擇性抑制劑3-TYP可以逆轉煙酰胺單核苷酸對線粒體功能的改善，煙酰胺單核苷酸可能是通過NAD+/Sirt3通路改善衰老MSCs的線粒體功能。A.ATP含量的檢測結果顯示，煙酰胺單核苷酸使細胞內ATP含量增加，而加入3-TYP后，細胞內ATP含量減少。B.DHE染色及定量分析(Bar=50μm)發現，煙酰胺單核苷酸使細胞內ROS水平降低，而加入3-TYP后使細胞內ROS水平升高。C.JC-1染色(Bar=50μm)顯示，煙酰胺單核苷酸使細胞的線粒體膜電位升高，而加入3-TYP后，細胞的線粒體膜電位降低。*P<0.05，***P<0.001。
本研究的前期工作發現，隨著MSCs衰老，細胞內NAD+含量減少，同時伴有Sirt3表達降低，且NAD+合成的前體煙酰胺單核苷酸能夠YiZhiFK866誘導的MSCs衰老。NAD+作為細胞能量轉化的重要輔酶，能夠參與多種代謝途徑并影響線粒體功能。NAD+耗竭與細胞衰老及能量代謝失調密切相關。由此我們推測，在MSCs衰老過程中，煙酰胺單核苷酸可能通過NAD+/Sirt3通路改善線粒體功能并進一步YiZhiMSCs衰老。然而，衰老MSCs中線粒體功能是否發生異常?煙酰胺單核苷酸能否改善衰老MSCs的線粒體功能?煙酰胺單核苷酸又是如何影響線粒體功能參與調控MSCs衰老?上述問題均不清楚。本研究擬從線粒體能量代謝角度揭示煙酰胺單核苷酸-NAD+/Sirt3網絡調控MSCs衰老的機制，為開發有效的Kang Shuai老藥物以及解決應用基礎ZhiLiao中干細胞不足問題提供實驗依據。補充煙酰胺單核苷酸可恢復正常的基礎糖酵解功能、線粒體功能和適應代謝應激的能力。
煙酰胺單核苷酸是哺乳動物體內煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamideadeninedinucleotide，NAD+)補救合成途徑的中間體。近年研究發現，人為補充煙酰胺單核苷酸能夠修復腦損傷、改善胰島功能、保護心臟免于缺血再灌注損傷、修復腦線粒體呼吸缺陷，對老年退行性疾病、視網膜退行性疾病、2型糖尿病、腦出血等均具有一定調理作用。煙酰胺單核苷酸是煙酰胺磷酸核糖轉移酶(Nicotinamidephosphateribosetransferase，Nampt)反應的產物，是NAD+的關鍵前體之一。在哺乳動物體內，煙酰胺單核苷酸由煙酰胺(Nicotinamide，Nam)在Nampt的催化下生成，隨后煙酰胺單核苷酸在煙酰胺單核苷酸腺苷轉移酶(Nicotinamidemononucleotideadenosinetransferase，煙酰胺單核苷酸at)的催化下生成NAD+。煙酰胺單核苷酸可能在DN腎小球炎癥纖維化過程中發揮作用。煙酰胺單核苷酸多少錢一噸
細胞外煙酰胺單核苷酸需要去磷酸轉化為煙酰胺核苷(Nicotinamideriboside，NR)才能進入肝細胞內部。陜西煙酰胺單核苷酸專業生產
Ummarino等通過新型酶偶聯技術還發現人乳和驢乳中存在煙酰胺單核苷酸，人乳中含量較高。加工特性研究發現，煙酰胺單核苷酸在水中或乳中，75℃處理5min，活性穩定；95℃處理5min后活性損失約20%，這表明在巴氏殺菌乳中添加煙酰胺單核苷酸具備理論的可行性。另有口服實驗表明，服食較低濃度的煙酰胺單核苷酸，30min內煙酰胺單核苷酸可以被快速吸收，有效地轉運到血液循環，并立即轉化為主要代謝組織中的NAD+。此外，在持續12月的干預期中，煙酰胺單核苷酸未顯示任何明顯的毒性和致死率，也沒有嚴重的副作用，具有較高的食品安全性。相信未來會有更多煙酰胺單核苷酸系列的食品、保健品造福人類生活。陜西煙酰胺單核苷酸專業生產
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