Oosight影像分析系統采用液晶偏光成像技術,無需對卵母細胞進行染色,即可實時、清晰、高對比度地進行紡錘體結構和透明帶成像,對ICSI、核移植操作、卵母細胞質量評價等有很好的輔助作用。
主要應用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細胞,避免卵的破裂損傷,增強胚胎的發育潛能。卵評估:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據采用的是準確的識別紡錘體,而非不準確的極體。質量控制:利用定量的分析數據對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。
核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質,使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細胞進行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養箱的顯微鏡)。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測量卵母細胞的透明帶;準確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態 紡錘體形態的變化反映了細胞分裂的不同階段。香港成熟卵母細胞紡錘體玻璃底培養皿
微管蛋白的突變和異常磷酸化是導致紡錘體功能障礙的主要原因之一。微管蛋白是構成微管的基本單元,其穩定性和功能對于紡錘體的組裝和染色體的分離至關重要。微管蛋白的突變和異常磷酸化會影響微管的動態平衡,導致紡錘體的組裝異常和染色體分離錯誤。紡錘體功能障礙會導致染色體不穩定,增加基因組的不穩定性。染色體不穩定會影響基因的表達和功能,導致細胞周期紊亂和細胞凋亡。在神經退行性疾病中,染色體不穩定會導致神經元的基因表達異常,進一步加劇神經元的損傷和死亡。 上海偏光成像紡錘體胚胎發育紡錘體的異常可能導致細胞分裂過程中的停滯或凋亡。
哺乳動物卵母細胞的紡錘體由微管組成,這些微管結構精細且高度動態,對溫度、滲透壓和機械力等外界因素極為敏感。在冷凍過程中,紡錘體容易因冰晶形成、滲透壓變化或機械損傷而遭到破壞,導致染色體分離異常,進而影響卵母細胞的發育潛力和受精后的胚胎質量。選擇合適的冷凍保護劑是減少紡錘體損傷的關鍵。然而,不同濃度的冷凍保護劑對紡錘體的影響各異,且不同哺乳動物種類之間也存在差異。因此,需要通過大量實驗來優化冷凍保護劑的配方,以大限度地保護紡錘體的完整性。
核移植,又稱體細胞核移植,是一種將體細胞的細胞核移入去核卵母細胞中的技術。這一技術的關鍵在于確保移植后的細胞核能夠在卵母細胞內重新編程,恢復全能性,并引導后續的胚胎發育。自1996年克隆羊“多莉”誕生以來,核移植技術便引起了全球范圍內的關注與研究熱潮。紡錘體是卵母細胞在減數分裂過程中形成的關鍵結構,負責精確分離染色體,確保遺傳信息的正確傳遞。然而,紡錘體對外部環境極為敏感,容易受到冷凍過程中溫度波動、滲透壓變化及冷凍保護劑毒性等因素的影響而發生損傷。因此,紡錘體卵冷凍技術的成功與否,直接關系到核移植后胚胎的發育潛力和質量。紡錘體的微管通過動態不穩定性來不斷增長和縮短,從而牽引染色體運動。
紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠在進行單精子卵胞漿內注射(ICSI)授精時,**初人們觀察人體內成熟的卵母細胞時,通常認為,卵母細胞紡錘**于***極體附近,故傳統的ICSI操作是轉動卵母細胞使其***極**于6點或12點處,然后在3點處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測儀后發現,***極體并不能很好地預測紡錘體的位置。一項研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結果發現小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動,或者紡錘體在胞質中的易位都使兩者的位置關系發生改變,普通光學顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀,可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻報道,在進行ICSI時,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學者發現,有些卵母細胞在普通光學顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體微管與細胞內的其他細胞器存在復雜的相互作用。香港成熟卵母細胞紡錘體玻璃底培養皿
紡錘體的研究對于理解遺傳信息的傳遞和維持具有重要意義。香港成熟卵母細胞紡錘體玻璃底培養皿
為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩定微管結構,防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術,研究者可以實時監測紫杉醇對紡錘體的保護效果,評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外,還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發育潛能,為臨床應用提供可靠依據。無需對細胞進行固定和染色,保持細胞的活性與完整性。能夠實時監測紡錘體的形態變化,評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態變化,提高評估的準確性。香港成熟卵母細胞紡錘體玻璃底培養皿