為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩定微管結構,防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術,研究者可以實時監測紫杉醇對紡錘體的保護效果,評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外,還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發育潛能,為臨床應用提供可靠依據。無需對細胞進行固定和染色,保持細胞的活性與完整性。能夠實時監測紡錘體的形態變化,評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態變化,提高評估的準確性。紡錘體的異常會導致細胞分裂錯誤,進而引發染色體不穩定性和遺傳性疾病。美國無損觀察紡錘體起偏器
染色體當細胞從間期進入有絲分裂期,間期細胞微管網絡解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體,再重組成紡錘體,介導染色體的運動;分裂末期紡錘體微管解聚,又重組形成細胞質微管網絡。可分為:動粒微管:連接染色體動粒于兩極的微管。極間微管:從兩極發出,在紡錘體中部赤道區相互交錯的微管。星體微管:中心體周圍呈輻射分布的微管。染色體的運動依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過程中動粒微管與動粒之間的滑動主要是依靠結合在動粒部位的驅動蛋白和動力蛋白沿微管的運動來完成。極微管在紡錘體中部交錯,有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達蛋白,其中2個馬達蛋白沿一條微管運動,另2個馬達結構域沿另一條微管運動。由于2條微管分別來自二極,故極性相反。當雙極驅動蛋白四聚體沿微管向正極運動時,紡錘體二極間距離延長。反之紡錘體距離縮短。昆明非侵入式成像紡錘體卵細胞評價紡錘體在細胞分裂中的功能受到嚴格的時間和空間控制。
選擇合適的冷凍保護劑是減少冷凍損傷的關鍵。然而,不同濃度的冷凍保護劑對MI期卵母細胞紡錘體的影響各異,需要通過大量實驗進行優化。此外,冷凍保護劑的滲透性和毒性也是需要考慮的因素。冷凍和解凍過程中的溫度控制、時間控制以及操作手法等都會對MI期卵母細胞的紡錘體造成影響。因此,需要不斷優化冷凍和解凍程序,以減少對紡錘體的損傷。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優化冷凍保護劑的配方,取得了進展。例如,一些研究表明,使用高濃度的蔗糖作為冷凍保護劑可以提高MI期卵母細胞的存活率和紡錘體穩定性。此外,還有一些新型冷凍保護劑如乙二醇、丙二醇等也被應用于MI期卵母細胞的冷凍保存中。
微管蛋白的突變會影響微管的聚合和解聚,導致紡錘體結構異常。例如,某些疾病中,微管蛋白的突變會導致紡錘體功能障礙,增加染色體非整倍性的風險。動粒與微管結合能力下降:動粒是染色體與紡錘體微管連接的關鍵結構,其功能障礙會影響染色體的正確捕捉和分離。例如,某些基因突變(如BUBR1突變)會影響動粒的功能,導致染色體分離錯誤。動粒通過信號傳導途徑與紡錘體檢查點相互作用,確保染色體的正確分離。動粒信號傳導異常會導致紡錘體檢查點失效,增加染色體非整倍性的風險。 研究紡錘體的結構和功能有助于深入了解細胞分裂的復雜機制。
盡管紡錘體成像技術已經取得了明顯的進展,但仍存在一些挑戰和限制。例如,目前的高分辨率成像技術往往需要對樣品進行特殊處理或標記,這可能會對細胞的活性和功能產生影響。此外,成像速度和分辨率之間仍存在權衡關系,如何在保持高分辨率的同時提高成像速度是當前研究的重點之一。未來,隨著成像技術的不斷創新和進步,紡錘體成像技術有望實現更高的分辨率、更快的成像速度和更好的細胞活性保持能力。例如,基于量子點的熒光標記技術、基于人工智能的圖像重建算法以及基于超快激光的成像技術等都有望為紡錘體成像技術的發展帶來新的突破。此外,結合其他細胞生物學技術,如基因編輯、蛋白質組學等,紡錘體成像技術將能夠更深入地揭示細胞分裂的復雜機制和紡錘體的功能作用。 紡錘體的形成與消失是細胞周期中高度動態的過程。美國Hamilton Thorne紡錘體Oosight Basic
紡錘體微管的排列和穩定性受到細胞骨架的支撐。美國無損觀察紡錘體起偏器
秋水仙素為什么會使有絲分裂的細胞停滯于中期如果用秋水仙素處理有絲分裂的細胞,紡錘體會迅速消失,細胞停滯在有絲分裂中期,染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進行誘導,從而將細胞阻斷在細胞分裂中期,也是誘導細胞周期同步化的重要方法之一。真核細胞周期可分為4個時期,分別是G1期、S期、G2期和M期。在細胞周期調控中主要有3個控制點,***個控制點在G1期,決定細胞能否進入S期;第二個控制點在G2期,決定細胞能否進入有絲分裂期;第三個控制點在M期,決定細胞是否已經準備好將復制好的染色體拉向兩極。CDK(周期蛋白依賴性蛋白激酶)對細胞周期運行起著**性調控作用,CDK與不同時期的周期蛋白結合會在特定周期起調節作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調節功能的兩種主要周期蛋白。細胞周期運轉到分裂中期后,在后期促進復合物(APC)的作用下,M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解,Cdkl活性喪失,細胞周期便從M期中期向后期轉化。APC活性變化是細胞周期由分裂中期向后期轉換的關鍵因素,其活性受到多種因素的綜合調節,紡錘體組裝檢查點是其重要的調控因素。紡錘體組裝不完全,或所有動粒不能被動粒微管全部捕捉,則APC不能被***。美國無損觀察紡錘體起偏器