檢查具備條件受檢者,經歷一段經常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時);[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,以**方式獲取精液,一次全部射入容器,蓋上蓋,記錄標本離體時間;貼身保溫,30分鐘內送到化驗室,并向檢驗員提供標本取出時間。精液常規觀察:精液總容量(毫升),精子活動情況,精子密度(個/毫升),精液液化時間(標本取出到精液液化的時間),不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,須染色方可區分:不活動的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗,仍然找不到精子;方可報告無精。經三次取樣化驗,結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。精子分析儀參數,精子頭側擺幅度(ALH)?:精子頭關于其平均路徑的側向位移幅度。上海馬精子分析DAP
方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數精液的結果。結果:計數乳膠珠時,CellVU計數池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數池和Makler計數池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數精液時,CellVU計數池與CASA系統結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數池和Makler計數池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數池、CASA系統與血細胞計數池、Makler計數池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數精液時,CASA系統與CellVU計數結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數方法。北京密度精子分析負相差精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數。
精子手工計數原理及操作方法1.原理:將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后,混勻注入計數池內計數,再算出每毫升精液中精子數。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》)1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式:精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/ml
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。不同品牌CASA分析的結果差異較大,因此,更高效精確的精液質量檢測系統對促進男科學發展具有重要的意義。
[臨床意義]1.若數日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統的特異性***,如結核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統的炎癥、結核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統炎癥。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,**后1小時內有Ⅲ級以上活動能力的精于應>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,無活動能力,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。CASA系統通過計算機分析精子運動參數,能夠提供精確的量化數據,優于人工檢測方法。美國濃度精子分析VAP
Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優點。上海馬精子分析DAP
精子分析儀使用注意事項1.樣品制備是CASA取得高質量檢查結果的關鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內自由運動。取樣分析前標本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計數池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計數的準確性。3.精子樣品密度過大時,造成圖像處理上的粘連,無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時,需增加檢查視野數量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。上海馬精子分析DAP