深圳細胞內膜打孔壓電平口針

**近幾年來，Piezo-ICSI法（壓電顯微受精法）被高度重視。使用了Piezo-ICSI法，與常規的顯微受精技術相比，對卵子的損害更小。結果顯示，用Piezo法會提高受精率，之后受精卵的發育也更好。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法，與傳統ICSI顯微受精方式不同，采用平口而不是尖口的精子注射針，通過超音振動技術打開卵子透明帶再將精子注入卵子，從而一定程度上減少了注射過程對卵子產生的損害，使高齡女性胚胎養囊率有所提升。臨床數據顯示，特別是針對一些大齡及反復受精失敗的情況，Piezo-ICSI比常規ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%，受精以后的退化率（即停止分裂）從18.6%降低到11.9%。而妊娠率從14.9%提高到23.1%。操作穩定性更強事實上相較Piezo法，常規的顯微受精方法從穩定性上更難操作。用汽車來舉例的話，Piezo法相當于自動檔汽車，常規的顯微受精方法相當于手動檔汽車，Piezo法可以縮短培養師的培訓時間。日本只有10家能做Piezo即使在日本，采用Piezo法的醫院也不太多。在日本有600家進行體外受精、顯微受精的醫院，而采用Piezo法的醫院或許也就10家左右。從現在起Piezo法的優勢會得以重新評估，或許10年，20年后會在世界各地得以普及。“PIEZO PMM 6”是一種壓電顯微操作系統，作為壓電注射的先驅，投入了大量的資源進行其研發。深圳細胞內膜打孔壓電平口針

“ICSI”（intracytoplasmicsperminjection）指卵胞漿單精子注射，其操作主要涉及“精子制動-精子拾取-破膜-注射”幾個步驟，其中在“破膜”（即使用注射針刺破卵膜，以便將單個精子送入卵胞漿）這一步，部分患者的卵子會出現“無破膜感”這一特征，這是怎么回事呢？原來，進行ICSI操作的時候，并不是直接用注射針徑直扎破卵膜。技術書籍這樣描述道：“調節顯微操作作針和卵膜至同一水平面，將注射針中的精子推至針尖處，注射針從卵子3點鐘位置穿入透明帶并繼續進針，至卵中心或越過中心位置。由于卵膜的彈性，進針處卵膜出現‘漏斗狀’，但卵膜仍未破裂，需輕微回吸注射針以確認膜破裂。一旦刺破卵膜可見到胞漿和精子的一個‘快速反流’的過程或可見卵膜‘回彈’現象，之后將精子注入卵子胞質內。這是正常情況下的破膜操作，而文章開頭提到的“無破膜感”，則是指注射針穿入透明帶的同時也立即穿透卵膜，不形成漏斗狀結構，看不到胞漿的快速返流或回彈現象。學術界給具有這一特征的卵子細胞膜起了個特有名稱——脆性卵膜。上海prime tech壓電活檢PMM 6 MB-D-2中等力度輸出型號，適用于ICSI、ES細胞注射、活檢操作等。

為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化？如下：一、卵子成熟度不足。卵子的成熟包括核成熟（以排出***極體為標志）以及胞質成熟，而胞質成熟往往滯后于核成熟，兩者并不完全同步。有對照研究表明，脆性卵膜組的成熟卵細胞比例***低于正常破膜組，ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組，這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關性，并**終影響了卵子ICSI后是否存活。二、雌***水平。到目前為止，關于雌***水平對脆性卵膜的影響，現有的研究結論并不一致，但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性。三、ICSI機械操作。一方面ICSI是侵襲性操作，可能破壞卵膜、細胞骨架等細胞器，另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護作用，細胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化，除了改善注射方式（如進針前利用激光穿透或削薄透明帶，操作盡可能輕柔等），還可采用改進的Piezo-ICSI（壓電脈沖破膜輔助ICSI），能有效改善注射后卵子退化的情況。此外，在臨床促排卵方面，也可考慮調整藥物用量，在保證卵泡大小均勻的情況下，盡量推遲扳機時間，提高卵母細胞成熟度，減輕ICSI后卵子退化的比例，以盡可能保證ART***的效果。

Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養皿上蓋,準備操作盤；按照Piezo操作系統的要求，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處，在20-25℃室溫下，準備進行顯微操作。具體操作前，首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合；再將單個精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾；連續剪切5個精子后，將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中。注射時，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞，使紡錘體保持在6點或12點的位置，從3點的方向輕輕進針，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時，將精子頭吹至針尖處，繼續進針，直至針尖插入卵母細胞深處，幾乎貼近對側質膜時，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜，將精子頭吐出，回吸注入卵內多余的操作液，輕輕退針，完成一次注射。依次操作，盡快實現該批卵母細胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎，并且移入CO?箱培養。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射，在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射。壓電式顯微操作儀PMM可用于ES細胞注射等實驗。

輔助生殖4大通用技能一技能：人工授精二技能：體外受精三技能：卵巢移植四技能：單精子顯微注射技術一般而言，體外受精是妥妥的主加技能，應用***。1.單精子顯微注射技術單精子顯微注射技術（簡稱ICSI，即Intracytoplasmicsperminjection的英文縮寫）指胞漿內單精子顯微注射技術。該技術是借助顯微操作系統將單個精子頭注入小鼠卵子胞漿內,使卵子受精，體外培養到早期胚胎，再放回母體子宮內發育著床。在臨床上，ICSI即第二代“試管嬰兒技術”。PMM和傳統方法相比提高了速度和準確率,也就是說增加了效率。深圳細胞內膜打孔壓電轉基因

PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。深圳細胞內膜打孔壓電平口針

注射—將含一個已制動精子的注射管輕柔刺破透明帶和卵膜，進入卵母細胞中心。注入精子時，應盡可能少地帶入培養液。之后使用負壓破壞卵膜，隨后輕柔抽吸細胞質。精子置入、穿過卵膜和抽吸細胞質以***卵母細胞的不同方法對受精和胚胎發育率的影響是一個研究熱點。壓電輔助的ICSI是一種新型方法，目前已在有ICSI結局不良病史和MⅡ期卵母細胞有限的患者中使用。在ICSI操作過程中，該技術對卵母細胞的損傷較小且可改善受精率和胚胎質量。目前使用壓電驅動管的新型ICSI注射技術已成功用于多種哺乳動物。由于該注射器采用超聲切割力(而不是刺穿力)穿透卵膜，注射過程中卵母細胞幾乎沒有變形，因此其對卵母細胞的損傷大幅減少。該技術實現的存活率和成功率同樣高。注射后，根據標準實驗室方案培養卵母細胞。受精ICSI后，受精率為50%-80%。雖然ICSI不可保證一定受精，但完全受精失敗的發生率較低，通常發生于獲卵數較低的周期。受精失敗的原因通常不是未置入精子或卵母細胞排出精子。其可能是由于卵母細胞***失敗，這通常與卵母細胞質量較差或精子無活性有關。深圳細胞內膜打孔壓電平口針