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精子手工計數原理及操作方法

1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。

3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/ml 精子分析儀與人工方法相比具有客觀，高效，高精度的優點。上海精子分析STR

男科實驗室中通常所指的質量包含三個方面：實驗室內部質量、醫生處置的質量以及結果的質量［3］。1．實驗室內部質量與**分析有關的實驗室內部質量主要是工作人員的素質和所采用儀器的質量。工作人員應經過特殊的培訓?儀器必須處于正常狀態、確保準確的結果?操作應符合規程［4］。CASA系統本身的質量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密；因此?有關軟件的數學上、信息性的、統計學的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。北京計算機輔助精子分析WOB該設備還具備良好的售后服務，Hamilton Thorne公司提供培訓和技術支持，確保用戶能夠充分利用設備的功能。

七、精子形態檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精細胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時已進入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3. 睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時，精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。

八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC)：＜5個/HP(高倍鏡視野)；紅細胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2．精液中紅細胞增多，常見于精囊結核、前列腺*等。3. 精液中若查到*細胞，對生殖系*有診斷意義。

1.基本檢查：是確定精液變量穩定的常規方法，不僅是男科實驗室，任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法，但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優先方法，伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明，鑒別快速前向運動精子非常重要。因此，關于精子活力分級，第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調，精子形態學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態率的判斷，則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液，應單獨計算并在報告中注明；Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。

**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規檢測方法。目前我國醫學實驗室普遍使用人工方法進行分析，結果缺少準確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規分析的標準方法，但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對精子的活率和活力的分級主要依賴檢驗者的經驗和主觀判斷，不同的技術人員分析的結果有時相差甚遠，對精子運動能力的判斷缺少嚴格的量化指標。因此應用一種統一、標準和快速的檢測方法替代人工方法十分必要。計算機計算機輔助**分析系統在**質量檢測中的應用49中國衛生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析（Computer-aidedSpermAnalysis,CASA）系統逐步取代了人工操作，在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術彌補了人工方法進行**分析的不足。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。南京Hamilton Thorne精子分析LIN

選擇合適的CASA檢測原理和設備，確保幀率要求，避免因設備問題影響檢測結果?。上海精子分析STR

在精子形態學檢查中，通過CASA系統對精子形態學特征進行分析，有些特征（細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇，這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結果一致性較差[10]。4結論和展望計算機輔助**分析具有較好的可靠性、重復性和穩定性，與傳統的光學顯微鏡目測估計相比，更具有快速方便、對比性強、便于交流等明顯優點[11]，常規**檢查無法測定精子微細運動特點，顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優越性。王益鑫亦發現，部分手工**檢查正常的不育患者，進行**全自動分析及生化檢測，均發現明顯異常[12]。因此，CASA系統在男性生殖能力檢驗方面具有重要的實際應用意義。上海精子分析STR