云南細胞免疫組化外包

來源: 發布時間:2025-04-14

免疫組化的實驗步驟

免疫組化的實驗步驟通常包括組織固定、切片、抗原修復、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色和復染等。首先,組織樣本需要經過固定(如福爾馬林固定)以保持其形態結構。然后,將固定后的組織包埋在石蠟中并切成薄片。抗原修復是為了暴露被固定過程掩蓋的抗原表位,常用的方法有熱修復和酶消化。封閉步驟是為了減少非特異性結合,通常使用血清或BSA。一抗孵育是關鍵步驟,一抗與目標蛋白特異性結合。二抗孵育則是通過二抗與一抗結合,并連接顯色系統。,通過顯色和復染使目標蛋白可視化。 如何做好免疫組化實驗?云南細胞免疫組化外包

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免疫組化(IHC)利用抗體檢測組織切片中蛋白質和其他抗原的定位。

英瀚斯生物實驗外包,自有專業病理實驗室,可高效完成免疫組化檢測。

抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測或熒光染料熒光檢測進行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質印跡或ELISA,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達譜對病理學家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實驗成功的關鍵在于穩定、優化且可重復的染色方案,而該方案應使用高質量的特異性試劑。 安徽小鼠免疫組化要多少錢做免疫組化的目的是什么?

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免疫組化的結果分析:

免疫組化實驗通常需要設置陽性對照、陰性對照(或替代對照)(陽性對照是排除方法和實驗系統有無問題;陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色)。一般情況下,陽性對照顏色的特點為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質具有結構性。且染色的強度不同(顏色深淺不一);陰性對照的特點為:染色細胞與組織無區別,顏色具有彌散性,分布均勻。

英瀚斯生物可承接各類病理染色,包括免疫組化。

說明:免疫組化實驗可以對結果進行定量分析,但要實驗得到的必須是高質量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結果才會比較準確。

免疫組化臨床應用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,初步區分組織學類型用非特異性抗體,在其基礎上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現出角蛋白,這同時也強調了在cancer診斷中應使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進行聯系,我們也有做免疫組化的服務!有沒有做免疫組化比較好的公司?

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什么是免疫組化?免疫組化的原理是什么?

1、定義:用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學(immunohistochemistry)技術或免疫細胞化學(immunocytochemistry)技術。

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2、原理:根據抗原抗體反應和化學顯色原理,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應,前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結合,通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。 免疫組化失敗的原因?福建病理免疫組化多少錢

免疫組化如何得到好的效果?云南細胞免疫組化外包

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色? 

(1)縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。

(2)一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。

(3)內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色; 

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(4)非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果; 

(5)縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等; 

(6)適當增加PBS沖洗次數和浸洗時間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要; 

(7)防止標本染色過程中出現干片,這容易增強非特異性著色。 云南細胞免疫組化外包

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