免疫組化技術有哪些應用?
定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法,免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高,是定位檢測分析優先方法,尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉移性惡性**的原發部位;對某類**進行進一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現,使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。
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免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色?
(1)縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。
(2)一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。
(3)內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;
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(4)非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;
(5)縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等;
(6)適當增加PBS沖洗次數和浸洗時間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要;
(7)防止標本染色過程中出現干片,這容易增強非特異性著色。 山東切片免疫組化怎么樣如何做好免疫組化實驗?
免疫組化的局限性:在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發現及越來越多的新型抗體的出現,免疫組化在病理診斷和醫療中已有了很重要的位置,對于cancer診斷、鑒別診斷、分類及諸多方面產生了重大的影響。但是免疫組化技術還存在著缺陷和不足,作為病理醫生和病理技術人員不僅要充分認識到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來的誤區,這就要求病理醫生和病理技術人員在工作中不斷學習與研究,在實際操作中總結經驗教訓,分析失敗原因,努力實現操作規范化、標準化,才能充分發揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床醫療中的指導作用。
臨床應用中,藥物靶點免疫組化,英瀚斯生物專業做實驗外包服務,一站式醫學科研平臺。免疫組化及分子病理學方法在疾病診斷中只只起輔助醫療的作用,而藥物病理學是用病理學的方法確定藥物醫療的靶點、評價藥物醫療的療效、預測藥物醫療的反應,因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”。因此對于對照的設置、質量的控制均需要更高的要求,如對試劑的要求,不同于一般的診斷試劑,應按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫療的依據。免疫組化技術的原理、分類和優點!
醫療和預后有關的免疫組化。與醫療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫療與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數越高,表明其增殖指數越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發現Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結轉移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫療中是否需要加入內分泌ji素阻斷醫療,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫療反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。有沒有推薦的免疫組化外包公司?山西組織免疫組化多少錢
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免疫組化的抗原修復
很多抗原的可視性可以通過抗原修復來提高,抗原修復可以打破福爾馬林固定時形成的蛋白質交聯,從而使被掩藏的抗原顯現出來。抗原修復技術包括不同時間長度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會用到微波爐,高壓鍋,蒸箱或水浴。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時間。**常用的抗原修復液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復:檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,預熱到95-100°C。將切片浸沒于染色盤中。蓋子虛掩,孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時間)。關掉蒸箱或水浴,將染色盤置于室溫下,讓切片冷卻20分鐘。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次,每次2分鐘。開始封閉步驟。 遼寧組織免疫組化多少錢