HE染色法的話,不能準確說出細胞器的顏色,實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。或者詳細說明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。HE染色 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一。江西性價比高的HE染色公司
HE染色標本一般是針對石蠟標本,脂滴和石蠟都是的有機物, 都具有非極,脂滴應該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。 H:Hematoxylin,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。 伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。南京英瀚斯生物黑龍江HE染色多少錢脾臟組織HE染色如何觀察。
HE染色實驗步驟:(1)樣品制備:對于貼壁生長細胞,胰酶消化,調整細胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應時間后,取出細胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌。(4)分色:鏡下觀察,若細胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數秒,自來水洗滌。(5)染胞質:浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌。(6)吹干或自然晾干細胞爬片后,中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定,則染色時間相應延長,蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,促進伊紅與胞漿蛋白質結合,其本身不參與染色的反應。當蘇木素染色效能極高,很短時間就導致核漿共染時,可適當地添加冰醋酸(一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現在有商用的HE染色液賣,但是質量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產生氧化膜和結晶,這也是提示更換蘇木素的標志之一)。心臟組織HE染色如何觀察。
HE染色原理:易于被堿性或酸性染料著色的性質稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現象稱為中性(neutrophilia)。構成組織內蛋白質的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細胞內的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經細胞內的粗面內質網及透明軟骨基質等均被堿性染料染色,這些物質稱為嗜堿性。而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質稱為嗜酸型。如果改變染色液的酸堿度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝浴K哉f染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。讓您放心的實驗外包公司,專業(yè)HE染色實驗服務平臺。河北靠譜的HE染色報告
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HE染色伊紅著色淡分析及應對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍化液殘留過多;(3)切片太薄;(4)切片經伊紅染色后在乙醇脫水時間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長,因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉。江西性價比高的HE染色公司