Elisa試劑盒有著準確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優點,深受廣大用戶朋友的喜愛.然而,在實驗過程中,也需要注意很多問題。包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問題。加樣是一項很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附,一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性.酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性。ELISA試劑盒方便試驗操作者準確地做稀釋工作。佛山ELISA試劑盒怎么賣
酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致疾病作用,應注意防護。有條件者應使用不致疾病、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。汕頭ELISA試劑盒生產商ELISA試劑盒板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結果。
洗滌在ELISA 試劑盒過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以去除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA 操作中,洗滌是較主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。
ELISA試劑盒在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA試劑盒不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。ELISA試劑盒固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。海南ELISA試劑盒采購
ELISA試劑盒間接地放大了免疫反應的結果。佛山ELISA試劑盒怎么賣
ELISA試劑盒具有以下幾個優點:吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;穩定的重復性和可靠性;靈敏、特異的抗體;節約實驗經費;適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;LISA試劑盒在的實際使用中,通過不同的規劃,具體的辦法過程可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、使用親和素和生物素的ELISA。ELISA試劑盒以免疫學反應為根底,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化效果相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。佛山ELISA試劑盒怎么賣
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